JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:08 min. • March 31st, 2026
Zacznij od myszy, której przewód pokarmowy jest kolonizowany przez Clostridium difficile, beztlenowego, zarodnikowego bakteriowirusa.
Unieruchom mysz i pozwól jej naturalnie wypróżnić się do sterylnej, wcześniej zważonej rurki.
Określ masę netto próbki kału, odejmując masę pustej probówki od całkowitej masy, aby przygotować odpowiednie rozcieńczenia.
Przenieś próbkę do środowiska beztlenowego, aby zachować żywotność bakterii wrażliwej na tlen.
Dodaj bufor do próbki i mechanicznie ją rozbij, aby uwolnić jej zawartość do zawiesiny.
Inkubować, aby umożliwić osad większych zanieczyszczeń, zatrzymując komórki bakteryjne i zarodniki w supernatancie.
Wykonaj szeregowe rozcieńczenia supernatantu w buforze.
Nakładaj rozcieńczenia na podłoże selektywne i inkubuj w warunkach beztlenowych.
Podłoże sprzyja kiełkowaniu zarodników i selektywnemu wzrostowi Clostridium difficile , jednocześnie hamując konkurencyjne bakterie, co skutkuje powstawaniem odrębnych kolonii.
Policz kolonie, aby ilościowo określić ładunek Clostridium difficile w kałach i ocenić kolonizację pokarmową.
Aby pobrać próbki kału od myszy do oceny, najpierw delikatnie, ale stanowczo unieruchom badaną mysz za luźną skórę na szyi i plecach,
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych