JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:03 min. • March 31st, 2026
Weź posiew bakteryjny zdolny do zakażenia tkanki liściowej.
Zeskrobaj kolonie i zawiesz w roztworze soli.
Zmierz gęstość optyczną, aby ocenić stężenie bakterii, a następnie rozcieńcz do pożądanego przedawkowania.
Wykonuj serialne rozcieńczenia, aby osiągnąć końcowe stężenie inokulum.
Dodaj środek powierzchniowo czynny, aby zmniejszyć napięcie powierzchniowe i zapewnić równomierne rozprzestrzenianie się bakterii na liściu.
Przenieś zawieszenie do szalki Petriego.
Następnie połóż dwa drewniane patyki na wierzchu doniczki Arabidopsis .
Odwróć roślinę na talerzu, zanurzając liście w zawiesienie.
Umieść układ w komorze próżniowej i zastosuj impuls próżniowy
Przyłożona próżnia usuwa powietrze z tkanki liścia przez naturalne otwory.
Uwalnianie próżni przywraca ciśnienie atmosferyczne, zmuszając bakterie do przebywania liści.
Powtórz impulsy, aby osiągnąć maksymalną infiltrację.
Wyjmij doniczkę. Następnie wytłucz nadmiar inokulum.
Liście Arabidopsis zainfekowane bakteriami są gotowe do dalszej analizy.
Rozpraszaj zapas glicerolu interesującego szczepu strzykawki Pseudomonas od minus 80 stopni Celsjusza do płytki LB uzupełnionej odpowiednimi antybiotykami. Inkubuj płytę w temperaturze 28 stopni Celsjusza
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych