JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:43 min. • March 31st, 2026
Zacznij od komórek nabłonkowych, w których ekspresja białka adaptora interferonowego, kluczowego mediatora odporności wrodzonej, została zmniejszona, co zwiększa podatność komórek na zakażenie Brucellą .
Zastąpić pośrednik pożywką zakażenia zawierającą zielone fluorescencyjne białko ekspresyjne Brucella abortus, fakultatywnego patogena wewnątrzkomórkowego, w pożądanym stężeniu.
Wiruj płytę, aby wspierać kontakt bakterii z komórkami gospodarza, a następnie inkubuj, aby umożliwić internalizację bakterii.
Przemyj komórki medium zawierającym surowicę i podaj antybiotyk, aby wyeliminować bakterie zewnątrzkomórkowe.
Inkubuj dalej, aby Brucella mogła się rozmnażać wewnątrzkomórkowo.
Przemyj komórki buforem i utrwal je paradehydem, aby zachować struktury wewnątrzkomórkowe.
Zmyj nadmiar utrwalacza. Następnie dodaj bufor z dodatkiem detergentu, aby przepuścić komórki.
Zmyj resztki detergentu, następnie dodaj DAPI, aby zabarwić jądra, i wykonaj ostatnie pranie.
Za pomocą mikroskopu automatycznego wykonuje się wysokoprzepustowe obrazy zakażenia Brucellą w komórkach nabłonka gospodarza.
Za pomocą zautomatyzowanej myjki płytowej wymień medium transfekcyjne na 50 mikrolitrów podłoża zakaźnego. Wewnątrz ok
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych