JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:44 min. • March 31st, 2026
Zacznij od wkładki Transwell zawierającej współhodowlę komórek nabłonkowych i pucharowych.
Komórki nabłonkowe tworzą ciasne połączenia, natomiast komórki przypominające kielich produkują śluz, naśladując barierę nabłonkową in vivo.
Weź zawiesię społeczności bakteryjnej jamy ustnej, która została poddana symulacji płynu jelitowego, aby naśladować trawienie jelita cienkiego.
Zamień podłoże w górnej komorze na zawiesinę bakteryjną.
Inkubuj z potrząsaniem, aby ułatwić zgęcenie i internalizację bakterii.
Zbieraj podłoże z górnej komory zawierającej nieprzylegające bakterie do kolejnych testów żywotności.
Dodaj roztwór rozpuszczający śluz i inkubuj, aby rozpuścić śluz i uwolnić przyklejone bakterie.
Zbierz roztwór do dalszej analizy żywotności bakterii i przyczepności.
Umyj komórki buforem i dodaj detergent, żeby je usunąć.
Zbierz zawiesinę komórkową.
Wykonaj zawiesinę w wirze, aby zlikwidować komórki i uwolnić zinternalizowane bakterie.
Wirówka i zbieranie supernatantu oraz odpadów komórkowych osobno do dalszej analizy.
Po umyciu i dostosowaniu gęstości komórek trawienia jelita cienkiego zgodnie z protokołem tekstowym usuń ośrodek wierzchołkowy z systemu przejściowego i dodaj 1,5 mililitra zawiesin
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych