JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 5:12 min. • March 31st, 2026
Zacznij od małych kawałków schłodzonej tkanki liściowej, w których łyk jest zainfekowany patogenem bakteryjnym.
Umieść kawałki w moździerzu z ciekłym azotem, aby zahamować aktywność nukleaz rozkładających DNA.
Miel, aby mechanicznie rozbić komórki i uwolnić składniki wewnątrzkomórkowe.
Użyj schłodzonej łopatki, aby przenieść proszek, dodać bufor lizowy i zawortować zawiesinę.
Inkubować do lizowania jąder roślin i komórek bakteryjnych, uwalniając DNA i RNA podczas denaturacji białek.
Dodaj RNazę i inkubuj, aby rozłożyć RNA.
Dodaj bufor wydzielania białek, aby zagregować białka, a następnie wiruj je, aby je rozdzielić.
Przenieś supernatant zawierający DNA roślin i bakteryjnych do izopropanolu, aby wytrącić DNA w formie nici nici.
Wirówka, aby pobrać DNA i usunąć supernatant.
Przemyj etanolem, potem wiruj i wyrzuć supernatant.
Susz DNA na powietrzu, następnie dodaj bufor rehydracyjny i inkubuj ją, aby je rozpuścić.
Próbki DNA są już gotowe do dalszego wykrywania patogenów za pomocą PCR.
Użyj czystych nożyczek, aby odciąć cały świeży liść z drzewa cytrusowego i włożyć go do czystej plastikowej torebki na kanapki. Następnie schłodzić moździerz, dodając niewielką ilość ciekłego azotu. Następnie użyj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych