JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:08 min. • August 31st, 2026
Rozpocznij od systemu bioreaktora zawierającego odkomórkowane rusztowanie wątroby szczura repopulowane ludzkimi komórkami wątroby.
Rusztowanie jest utrzymywane w systemie przepływowym, który krąży pożywkę w celu dostarczania składników odżywczych.
Napełnij strzykawkę buforem zawierającym rekombinowany wektor wirusa towarzyszącego adenowirusom (AAV).
Wektor przenosi samouzupełniające DNA z kasetą transgenu kodującą fluorescencyjny reporter oraz RNA wyciszające geny.
Zatrzymaj przepływ medium i odłącz rurkę doprowadzającą.
Wstrzyknij wektor przez główną naczynie krwionośne zaopatrujące rusztowanie.
Inkubować, aby umożliwić interakcję wektora z komórkami.
Wektor dostaje się do komórek wątroby poprzez endocytozę zależną od receptorów.
Po dostaniu się do wnętrza, wektor ucieka z endosomu i uwalnia swoje samouzupełniające DNA do jądra komórkowego.
Samouzupełniające się DNA umożliwia bezpośrednią ekspresję transgenu, prowadząc do produkcji białka fluorescencyjnego oraz RNA wyciszającego geny.
Stopniowo wznowić przepływ medium, aby przywrócić krążenie w rusztowaniu.
Przetransdukowany model wątroby jest teraz odpowiedni do dalszych analiz.
Następnie przeprowadź transdukcję modelu wątroby. Najpierw do s
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych