JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 5:56 min. • August 31st, 2026
Rozpocznij od lizatu komórkowego zawierającego DNA komórkowe zagregowane z białkami komórkowymi i cząsteczkami wirusowymi.
Dodać jony magnezu, a następnie nukleazę, aby aktywować enzymatyczną degradację komórkowego DNA i rozbić agregaty białkowo-DNA.
Odwiruj próbkę, aby oddzielić resztki komórkowe i zbierz nadsącz zawierający cząsteczki wirusowe.
Nanieś supernatant na nieciągły gradient jodiksanolu o stężeniach wzrastających od góry do dołu, a następnie dopełnij probówkę buforem.
Ultrawirówka do rozdzielania składników na podstawie gęstości. Cząsteczki wirusa gromadzą się na granicy między warstwą o wysokiej i średniej gęstości.
Wprowadź igłę na tym styku i zbierz cząstki wirusowe do probówki.
Należy dodać bufor zawierający składniki stabilizujące, co zapobiega agregacji cząsteczek wirusa.
Następnie przenieś roztwór do probówki z filtrem membranowym.
Wirować w celu skoncentrowania cząsteczek wirusa nad filtrem.
Dodać bufor uzupełniony o czynnik stabilizujący i ponownie odwirować, aby uzyskać oczyszczone cząsteczki wirusa.
Aby zebrać przetransfekowane komórki, należy je odczepić i zawiesić, pipetując w górę i w dół za pomocą pożywki hodowlanej. Następnie zawiesiny komórkowe należy przenieść d
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych