JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:09 min. • September 30th, 2026
Należy pobrać ciała owadów zainfekowanych wirusem, zawieszone w buforze zawierającym czynnik chelatujący.
Przeprowadź homogenizację, aby rozbić tkanki owada i uwolnić składniki wewnątrzkomórkowe, w tym cząsteczki wirusa oraz reaktywne jony metali.
Agent chelatujący wiąże jony metali, zapobiegając powstawaniu reaktywnych form tlenu i chroniąc cząsteczki wirusa przed uszkodzeniami oksydacyjnymi.
Wykonywać ultrawirowanie w celu osadzenia wirusa i nierozpuszczalnych zanieczyszczeń, a następnie odrzucić nadsącz.
Dodaj bufor zawierający sole i detergent, a następnie resuspenduj osad poprzez wielokrotne pipetowanie. Detergent rozpuszcza bogate w lipidy zanieczyszczenia, aby uwolnić powiązane z nimi cząstki wirusa.
Wirować w celu osadzenia nierozpuszczalnych zanieczyszczeń. Zebrać nadsącz zawierający cząsteczki wirusowe.
Przefiltruj nadsącz w celu usunięcia pozostałych zanieczyszczeń i zbierz zawierający wirusa filtrat.
Przeprowadź dializę filtratu w wodzie w niskiej temperaturze, aby usunąć nadmiar detergentu i soli buforowych.
Wymieniaj wodę okresowo, aż do momentu wytrącenia cząstek wirusa. Wirus jest gotowy do dalszego użycia.
Homogenizować całe ciała osobników H. vitripennis wykazujących obecn
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych