JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:01 min. • September 30th, 2026
Zacznij od studni testowej zawierającej genetycznie zmodyfikowane komórki nowotworowe wykazujące ekspresję antygenu docelowego oraz studni kontrolnej z komórkami nowotworowymi pozbawionymi tego antygenu.
Należy zastosować bispecyficzny angażer limfocytów T (BTE) kodowany przez transgen wirusowy, posiadający dwa miejsca wiązania: jedno dla antygenu docelowego i drugie dla receptora specyficznego dla limfocytów T.
Dodaj BTE oraz limfocyty T do studzienek i inkubuj.
W próbce testowej BTE sieciuje komórkę nowotworową i limfocyt T, aktywując limfocyt T do uwalniania ziarnulek cytolitycznych.
Powoduje to lizę komórki nowotworowej, uwalniając enzym wewnątrzkomórkowy.
W kontroli BTE wiąże się wyłącznie z limfocytem T, co zapobiega lizie komórek nowotworowych.
Odwirukuj i zbierz nadsącz.
Dodaj substrat i inkubuj.
Enzym katalizuje przekształcenie substratu w produkt o czerwonej barwie.
Dodaj roztwór stopujący i zmierz intensywność barwy.
Wyższa intensywność w próbce badawczej potwierdza specyficzną w stosunku do celu aktywność immunomodulacyjną BTE.
Aby rozpocząć ocenę cytotoksyczności komórkowej indukowanej przez BTE za pomocą uwalniania LDH, należy najpierw wyizolować wydzielone produkty transgenu ek
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych