Labirynt Barnesa: metoda oceny uczenia się przestrzennego i pamięci u zwierząt laboratoryjnych

Labirynt Barnesa to okrągła platforma z równomiernie rozmieszczonymi otworami wokół krawędzi i skrzynką ewakuacyjną pod otworem docelowym. Zwierzęta laboratoryjne poruszają się po labiryncie, aby znaleźć dziurę docelową i uciec przed wrodzonymi awersyjnymi bodźcami, takimi jak otwarte przestrzenie i jasne światła.

Na początek umieść obiekt, na przykład mysz, w środku labiryntu pod ciemną komorą. Następnie podnieś komorę i wypuść zwierzę na arenę. Aby zmotywować badanego do skutecznego wejścia w otwór docelowy, użyj łagodnie awersyjnego bodźca, takiego jak dźwięk ultradźwiękowy.

Próba kończy się, gdy mysz znajdzie się w otworze docelowym lub upłynie określony czas. Uczenie się przestrzenne i pamięć są mierzone podczas każdej próby poprzez rejestrowanie liczby otworów, które badał badany, oraz czasu potrzebnego na ukończenie próby, a także mapowanie ścieżki zwierzęcia i nawigacji przestrzennej.

Przed rozpoczęciem procedury testowej labiryntu Barnes wyczyść wszystkie elementy labiryntu wodą i 70% etanolem. Gdy elementy wyschną, złóż labirynt i losowo przypisz każdą mysz do otworu docelowego, z którego będzie można korzystać przez cały okres testowania.

Otwory mogą być oznaczone jako od 1 do 20 na dnie labiryntu lub na zewnątrz obwodu labiryntu, gdzie nie są widoczne z wnętrza labiryntu. Aby rozpocząć test treningowy, zastąp przypisany dysk z otworami czarnym pudełkiem o wymiarach 23 na 11 centymetrów i użyj gumek i haczyków, aby mocno przymocować pudełko do labiryntu.

Następnie umieść mysz na środku labiryntu Barnesa pod kubkiem i pozwól myszy zaaklimatyzować się przez 30 sekund. Pod koniec okresu aklimatyzacji rozpocznij nagrywanie wideo i włącz świetlisty i ultradźwiękowy generator dźwięków.

Podnieś kubek za pomocą mechanizmu sznurkowego, aby uniknąć odchylenia początkowego kierunku zwierzęcia i uruchom minutnik za kurtyną obserwacyjną. Śledź ruchy zwierzęcia na kartce papieru ze schematem labiryntu i użyj diagramu do analizy strategii wyszukiwania myszy, a także do określenia liczby, które zostały zbadane w kwadrancie naprzeciwko celu.

Gdy mysz wejdzie do otworu docelowego, przykryj otwór ciężkim, nieprzezroczystym spoiwem i wyłącz ultradźwiękowy generator dźwięków. Jeśli mysz nie wejdzie do celu po 5 minutach, zagnij zwierzę do dołka docelowego. Następnie pozwól myszy pozostać w polu docelowym przez 1 minutę bez zakłóceń, upewniając się, że wyłączyłeś dźwięk ultradźwiękowy. Następnie włóż zwierzę z powrotem do klatki.

Kiedy wszystkie myszy zostaną przetestowane, ręcznie przejrzyj ich nagranie, aby śledzić ogólny ruch myszy, aby określić liczbę nieprawidłowych otworów zbadanych przed i po znalezieniu celu, a także liczbę od otworu docelowego do pierwszego zbadanego otworu i wszelkie godne uwagi zachowania związane z pielęgnacją.