Perfuzja wątroby myszy in vivo: metoda podawania roztworu do wątroby gryzoni przez żyłę wrotną

Po znieczuleniu i przygotowaniu gryzonia zlokalizuj żyłę wrotną i wsuń pod nią nić. Zawiąż luźny węzeł wokół żyły wrotnej, nie napinając jej. Spowoduje to ustabilizowanie cewnika dożylnego w dalszej części protokołu.

Trzymając igłę cewnika dożylnego skośnie do góry i równolegle do żyły wrogiej, włóż ją do światła - przestrzeni wewnątrz żyły. Wycofaj igłę i wepchnij cewnik przez żyłę aż do rozgałęzionego obszaru żylnego w wątrobie.

Po ustabilizowaniu cewnika zwiększ szybkość pompy perystaltycznej. Natychmiast wątroba powinna zblednąć, ponieważ krew zostanie zastąpiona płynem perfuzyjnym. Przetnij główne naczynie krwionośne, aby odprowadzić jeszcze więcej krwi i płynu perfuzyjnego z wątroby.

Ściśnij odcięte naczynie kilka razy, aby napompować wątrobę i upewnić się, że jest całkowicie pozbawiona krwi. Przełączyć pompę tak, aby przetapiała bufor do wątroby. Na koniec powtórz krótko napełnianie wątroby, uważając, aby nie rozerwać wątroby z tkanki łącznej.

Aby umieścić cewnik do żyły wrotnej, najpierw użyj tylnej części kleszczy, aby przesunąć jelita na prawą stronę jamy brzusznej myszy, odsłaniając żyłę wrotną, a następnie użyj zakrzywionych kleszczyków, aby wsunąć 20-centymetrowy kawał