Modelowanie raka błony moczowo-omoczniowej kurczaka: model in ovo do badania nowotworzenia i przerzutów komórek rakowych

Błona kosmówkowo-omocznaniowa kurczaka lub CAM jest wysoce unaczynioną błoną znajdującą się w jajach niektórych kręgowców, takich jak kurczaki. Ta błona pozaembrionalna wyściela błonę otoczki nienaczyniowej i działa jako miejsce wymiany gazowego tlenu i dwutlenku węgla między zarodkiem a środowiskiem.

Aby wygenerować model raka CAM, zacznij od żywego, zapłodnionego jaja kurzego z w pełni rozwiniętym CAM z częściowo otwartą skorupą, która odsłania jego rozgałęzione naczynia krwionośne. Upewnij się, że CAM jest odłączony od membrany powłoki.

Umieść sterylny nieprzywierający pierścień nad punktem rozgałęzienia naczynia krwionośnego. Za pomocą szklanego pręta delikatnie przetrzyj membranę wewnątrz pierścienia, aby zeskrobać jego zewnętrzną warstwę nabłonkową i odsłonić leżącą pod spodem warstwę mezodermalną przenoszącą naczynia krwione. Odpipetować schłodzoną zawiesinę komórek rakowych zmieszaną z odpowiednią macierzą zewnątrzkomórkową do pierścienia. Pierścień ogranicza dyspersję komórkową.

Pozwól, aby matryca zestaliła się, aby zabezpieczyć znajdujące się w niej komórki. Uszczelnij otwór skorupki jajka i inkubuj jajo w odpowiednich warunkach. Gęste unaczynienie w warstwie mezodermaln