JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:33 min. • April 30th, 2023
Aby wygenerować komórki oporne na chemoterapię, zacznij od pobrania zawiesiny ludzkich komórek raka prostaty w kolbie hodowlanej. Inkubować kolbę, aby ułatwić przyleganie komórek i ich podział w celu utworzenia monowarstwy.
Uzupełnij komórki roztworem leku przeciwnowotworowego o optymalnym stężeniu i inkubuj. Cząsteczki leku dostają się do komórek i indukują apoptozę we wrażliwych komórkach.
Niektóre komórki wyrażają specjalne transportery wypływu leku lub pompy, które okresowo usuwają leki. Mechanizm ten zapobiega akumulacji leków, dzięki czemu komórki te są odporne na działanie leków przeciwnowotworowych i stają się chemooporne.
Odessać pożywkę zawierającą leki i zanieczyszczenia z kultury. Uzupełnij świeżą, wolną od leków pożywką wzrostową, aby wspomóc wzrost komórek opornych na chemoterapię. Wyrzuć zużyte podłoże. Trypsynizuj komórki, aby oderwać je od kolby hodowlanej i przenieść do probówki.
Odwirować probówkę, aby granulować komórki. Usunąć supernatant zawierający trypsynę. Ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce wzrostowej. Hodować komórki w nowej kolbie hodowlanej.
Następnie powtórz etapy leczenia farmakologicznego i hodowli komórek, aby wystawić komórki oporne na chem
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych