Deparafinizacja i ponowne uwodnienie skrawków tkanek: dwuetapowa procedura usuwania wosku parafinowego z preparatów tkankowych FFPE, a następnie ponowne uwodnienie tkanek

Technika zatapiania parafiny w formalinie lub FFPE pozwala na zachowanie utrwalonych, odwodnionych i oczyszczonych próbek tkanek w blokach parafinowych w celu długotrwałego przechowywania. FFPE zachowuje białka i inne ważne składniki wewnątrzkomórkowe bez uszczerbku dla morfologii tkanek.

Deparafinizacja, czyli usunięcie wosku parafinowego otaczającego osadzoną tkankę, jest krytycznym krokiem przed przetworzeniem jakiejkolwiek próbki tkanki FFPE do dalszej analizy. Aby rozpocząć deparafinowanie, należy rozpocząć od szkiełka podstawowego zawierającego niezabarwiony wycinek tkanki FFPE o odpowiedniej grubości.

Zanurz wycinek tkanki w kąpieli ksylenowej i inkubuj przez żądany czas. Ksylen, rozpuszczalnik organiczny, rozpuszcza wosk parafinowy, który osiadł i wniknął w tkankę. Całkowite usunięcie wosku parafinowego odsłania utrwaloną i odwodnioną przezroczystą próbkę tkanki.

Po odparafinowaniu potraktować próbkę absolutnym etanolem. Etanol wypiera i usuwa wszelkie ślady ksylenu z wycinka tkanki. Następnie zanurz tkankę w malejących stężeniach etanolu. Proces ten ponownie nawadnia tkankę w celu dalszej analizy histologicznej.

Na koniec pozostaw zjeżdżalnię w spokoju przez żądany czas. T