Deparafinizacja i ponowne uwodnienie skrawków tkanek: dwuetapowa procedura usuwania wosku parafinowego z preparatów tkankowych FFPE, a następnie ponowne uwodnienie tkanek

0 wyświetleń2:43 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Technika zatapiania parafiny w formalinie lub FFPE pozwala na zachowanie utrwalonych, odwodnionych i oczyszczonych próbek tkanek w blokach parafinowych w celu długotrwałego przechowywania. FFPE zachowuje białka i inne ważne składniki wewnątrzkomórkowe bez uszczerbku dla morfologii tkanek.

Deparafinizacja, czyli usunięcie wosku parafinowego otaczającego osadzoną tkankę, jest krytycznym krokiem przed przetworzeniem jakiejkolwiek próbki tkanki FFPE do dalszej analizy. Aby rozpocząć deparafinowanie, należy rozpocząć od szkiełka podstawowego zawierającego niezabarwiony wycinek tkanki FFPE o odpowiedniej grubości.

Zanurz wycinek tkanki w kąpieli ksylenowej i inkubuj przez żądany czas. Ksylen, rozpuszczalnik organiczny, rozpuszcza wosk parafinowy, który osiadł i wniknął w tkankę. Całkowite usunięcie wosku parafinowego odsłania utrwaloną i odwodnioną przezroczystą próbkę tkanki.

Po odparafinowaniu potraktować próbkę absolutnym etanolem. Etanol wypiera i usuwa wszelkie ślady ksylenu z wycinka tkanki. Następnie zanurz tkankę w malejących stężeniach etanolu. Proces ten ponownie nawadnia tkankę w celu dalszej analizy histologicznej.

Na koniec pozostaw zjeżdżalnię w spokoju przez żądany czas. Ten krok pozwala na odparowanie etanolu i wody i uzyskanie suchego, uwodnionego skrawka tkanki.

Na początek przygotuj 10 mikrometrów niebarwionych skrawków zatopionych w parafinie utrwalonych w formalinie. Umieść szkiełka w szklanym uchwycie na szkiełko i napełnij je ksylenem, upewniając się, że cała tkanka na szkiełku jest zanurzona. Pozostaw szkiełka w ksylenie na 15 minut. Następnie wylej ksylen, trzymając szkiełka końcówką pipety, aby nie wypadły. Wlej więcej ksylenu do tego samego poziomu co poprzednio i powtórz inkubację.

Wylej ksylen i napełnij uchwyt szkiełka 100% etanolem, upewniając się, że cała tkanka na szkiełku jest całkowicie zanurzona. Pozostaw szkiełka w etanolu na 3 minuty. Następnie zastąp etanol świeżym etanolem i pozwól im inkubować jeszcze przez dwie minuty. Odlej etanol i usuń szkiełka. Ostrożnie połóż je ekranem do góry na czystym ręczniku papierowym i pozostaw do wyschnięcia na 10 minut.

10:59

Rekonstrukcja trójwymiarowej objętości histologicznej i jej zastosowanie do badania mysich gruczołów sutkowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:30

Przygotowanie utrwalonych w formalinie rdzeni tkankowych zatopionych w parafinie do ekstrakcji RNA i DNA

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:06

Oznaczanie poziomu ekspresji białek w hodowanych komórkach metodą immunocytochemii na blokach komórkowych zatopionych w parafinie

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:17

Konserwacja tkanek zatopionych w parafinie utrwalonej w formalinie (FFPE): metoda badania morfologii tkanek

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

03:53

Wstępna obróbka tkanek FFPE dla RNA CISH: procedura przetwarzania skrawków tkanek zatopionych w parafinie utrwalonych w formalinie do chromogenicznej hybrydyzacji RNA in situ

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:20

Przygotowanie próbki proteomicznej z tkanki utrwalonej formaliną i zatopionej w parafinie

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:38

Hybrid-Cut: ulepszona metoda cięcia opornych próbek tkanek roślinnych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:21

Protokół dla HER2 FISH z wykorzystaniem niesieciowanego, wolnego od formaliny utrwalacza tkankowego, aby połączyć zalety kriokonserwacji i utrwalania formaliny

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:52

Osadzanie parafiny i cienkie cięcie biofilmów kolonii drobnoustrojów do analizy mikroskopowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

05:00

Metoda cięcia i pływania tkanki zatopionej w parafinie do cięcia

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026