Kriokonserwacja oparta na witryfikacji: ultraszybka technika chłodzenia służąca do przechowywania próbek biologicznych w bardzo niskich temperaturach w celu długotrwałego przechowywania
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:24 min. • April 30th, 2023
Witryfikacja, ultraszybka technika kriokonserwacji, umożliwia chłodzenie żywych komórek i tkanek oraz przechowywanie ich w ekstremalnie niskich temperaturach przez bardzo długi czas.
Aby zeszkleić świeżo pobraną tkankę nowotworową, najpierw umieść ją na płytce hodowlanej. Wyciąć wszelkie martwicze obszary, obszary zawierające tłuszcz lub skrzepy krwi z guza. Umyj chusteczkę, aby usunąć wszelkie ślady krwi.
Tkankę pokroić w plastry o odpowiedniej grubości. Teraz przenieś plastry do probówki zawierającej roztwór witryfikacyjny składający się z DMSO lub dimetylosulfotlenku i sacharozy. Składniki te działają jak krioprotektanty, chroniąc komórki przed uszkodzeniem przez zamarzanie.
Inkubować w niskiej temperaturze. DMSO, krioprotektant przenikający komórki, dyfunduje przez błonę komórkową i zastępuje wodę w komórkach, aby zapobiec tworzeniu się wewnątrzkomórkowych kryształków lodu. Jednocześnie sacharoza, nieprzenikający krioprotektant, działa zewnątrzkomórkowo, ułatwiając odwodnienie komórek i zmniejszając tworzenie się wewnątrzkomórkowych kryształków lodu, aby zmniejszyć ryzyko śmierci komórki.
Umieść zrównoważone plastry guza na uchwycie na tkankę. Następnie przenieś ten zestaw do c
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych