JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:37 min. • April 30th, 2023
Wyściółka jelita pokryta jest wypustkami lub kosmkami i wgłębieniami lub kryptami. Krypty to gruczoły jelitowe, które przede wszystkim wydzielają enzymy trawienne.
Aby wyizolować krypty jelita cienkiego, zacznij od umieszczenia znieczulonej myszy w pozycji leżącej na desce sekcyjnej. Za pomocą nożyczek rozetnij otrzewną wzdłużnie, aby odsłonić układ trawienny.
Zlokalizuj jelito cienkie i delikatnie wyciągnij je z ciała myszy. Przetnij jelito u jego podstawy. Pobrane jelito przenieść do naczynia zawierającego odpowiedni bufor. Przeciąć jelito wzdłużnie, odsłaniając światło.
Umieść jelito, świetlistą stroną do góry, na desce do krojenia, aby odsłonić kosmki. Przesuń ukośne szkiełko po powierzchni jelita, aby zeskrobać kosmki, odsłaniając całe krypty.
Pokrój jelito na drobne kawałki i przenieś je do probówki zawierającej lodowaty bufor, aby zapewnić minimalne uszkodzenie krypt.
Następnie potraktuj EDTA i inkubuj. EDTA powoduje rozluźnienie całych krypt z wyściółki jelita. Usunąć zużyty roztwór zawierający EDTA. Dodać świeży bufor i rozcierać za pomocą pipety, aby oderwać krypty od błony śluzowej jelita.
Zbierz supernatant zawierający krypty do świeżej probówki. Uzupełnij probówkę odpo
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych