Dożylne wstrzyknięcie komórek rakowych do naczyń błony moczowo-omoczniowej kurczaka: procedura mająca na celu ustalenie modelu raka błony moczowo-omoczniowej w celu zbadania inwazji raka i przerzutów

Błona kosmówkowo-omocznaniowa kurczaka lub CAM zapłodnionego jaja kurzego jest błoną pozazarodkową wspieraną przez bogatą sieć naczyniową. Ta silnie unaczyniona błona wyściełająca błonę otoczki nienaczyniowej ułatwia wymianę gazów i składników odżywczych z rozwijającym się zarodkiem.

Aby wygenerować model raka CAM in vitro, zacznij od żywego, zapłodnionego, pozbawionego skorupy zarodka kurczaka z w pełni rozwiniętym CAM w naczyniu.

Następnie należy zmontować aparat do wstrzykiwań zawierający rurkę podłączoną do strzykawki przenoszącej jednokomórkową zawiesinę transdukowanych komórek nowotworowych w odpowiednim schłodzonym buforze. Podłącz niestandardową szklaną igłę do rurki, aby uzyskać wysoką precyzję dostarczania podczas kolejnego wstrzyknięcia.

Teraz przenieś zarodek pod mikroskopem. Zidentyfikuj odpowiednią żyłę w pobliżu punktu bifurkacji na powierzchni CAM. Wstrzyknąć zawiesinę komórek rakowych do wybranej żyły i zapewnić pełne dostarczenie. Delikatnie wycofać igłę. Przykryj zarodek i inkubuj go w odpowiednich warunkach.

Gęste unaczynienie w warstwie mezodermalnej zawiera wstrzyknięte komórki nowotworowe, ułatwiając tworzenie się guza pierwotnego. W końcu niektóre z tych kom