JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:24 min. • April 30th, 2023
Język stanowi warstwowy nabłonek płaskonabłonkowy i leżącą pod nim warstwę gęstej tkanki łącznej zwanej blaszką właściwą. Nabłonek składa się z wielowarstwowych płaskonabłonkowych komórek nabłonkowych, które zapewniają ochronę przed naprężeniami mechanicznymi.
Aby wyizolować komórki nabłonkowe, zacznij od świeżo zebranego języka myszy. Zmiel język, aby uzyskać mniejsze fragmenty tkanki. Następnie potraktuj fragmenty dostosowanym koktajlem trawiennym zawierającym kolagenazę, hialuronidazę i enzymy dezoksyrybonukleazy.
Kolagenaza i enzymy hialuronidazy trawią macierz zewnątrzkomórkową, która utrzymuje tkankę razem, sprzyjając uwalnianiu pojedynczych komórek do zawiesiny. Deoksyrybonukleaza rozkłada wolne DNA uwalniane z komórek poddanych lizie.
Dodać bufor zawierający surowicę do strawionej próbki, aby dezaktywować enzymy hydrolizujące białka. Teraz przefiltruj próbkę przez sitka komórkowe, aby usunąć wszelkie niestrawione fragmenty tkanek i zanieczyszczenia oraz uzyskać jednokomórkową zawiesinę komórek nabłonkowych.
Odwirować, aby oddzielić komórki. Odrzucić sklarowany osad zawierający mieszaninę wytrawiającą. Zawiesić osad komórkowy w świeżym podłożu. Na koniec przenieś żądaną obję
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych