JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:03 min. • April 30th, 2023
W niektórych nowotworach z przerzutami komórki nowotworowe oddalają się od miejsca pochodzenia i przenikają do tkanek nerwowych, zjawisko zwane inwazją okołonerwową lub PNI.
PNI można wykazać in ovo na powierzchni błony kosmówkowo-omoczniowej lub CAM, która naśladuje błonę podstawną ludzkiej tkanki nabłonkowej.
Na początek weź żywotne, zapłodnione jajo kurze z częściowo otwartą skorupą, odsłaniając w pełni rozwinięty CAM.
Następnie odizoluj zwoje korzenia grzbietowego lub DRG od rdzenia kręgowego myszy. DRG to skupisko neuronów czuciowych, za pomocą których komórki rakowe atakują przestrzeń okołonerwową.
Inkubuj DRG w odpowiednim podłożu z barwnikiem fluorescencyjnym, aby oznaczyć je w celu łatwej wizualizacji. Teraz przenieś DRG na powierzchnię CAM bez pękania membrany.
Przykryj jajko przezroczystą folią, aby zapobiec skażeniu mikrobiologicznemu. Następnie należy przeprowadzić inkubację jaja, aby ułatwić integrację DRG z CAM.
Po inkubacji wysiewaj fluorescencyjnie znakowane komórki rakowe na suchej powierzchni CAM, z dala od DRG. Sucha powierzchnia minimalizuje rozprzestrzenianie się komórek rakowych i umożliwia regularne tworzenie guza.
Uszczelnij otwór skorupki jajka i inkubuj g
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych