JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:08 min. • April 30th, 2023
W przypadku ekstrakcji rdzenia kręgowego zacznij od uśpionej myszy w pozycji leżącej. Rozpyl etanol, aby zapobiec potencjalnemu zanieczyszczeniu futra.
Przetnij linię środkową od głowy do ogona i otwórz skórę, aby odsłonić leżącą pod spodem tkankę. Zbadaj czaszkę myszy, aby zlokalizować połączenie czaszkowo-szyjne, które łączy czaszkę z kręgosłupem szyjnym.
Następnie naciąć połączenie czaszkowo-szyjne prostopadle, aby przeciąć połączenie między głową a szyją. Wypreparuj kręgosłup aż do piątego kręgu lędźwiowego. Następnie przetnij kręgosłup na piątym kręgu lędźwiowym, aby odciąć połączenie z dolnymi poziomami kręgów.
Teraz obróć mysz do pozycji leżącej. Rozetnij otrzewną i ścianę klatki piersiowej, aby odsłonić zarówno jamę brzuszną, jak i klatkę piersiową. Usuń narządy otrzewnej i zaotrzewnowej, aby uzyskać dostęp do kręgosłupa.
Wytnij żebra, aby oddzielić kręgosłup od reszty ciała. Na koniec spłucz izolowany rdzeń kręgowy zimnym roztworem soli fizjologicznej, aby zmyć wszelkie zanieczyszczenia krwi.
Po eutanazji zwierzęcia w komorze CO2 namocz futro 70% etanolem i pozostaw do wyschnięcia. Przypnij mysz w pozycji leżącej, a następnie wykonaj nacięcie w linii środkowej, rozciągające się czaszkowo-ogonowo od tylnej szyi do odcinka lędźwiowego kręgosłupa.
Następnie za pomocą kleszczy podnieś płaty skórne obustronnie i odsłonij tkankę podskórną. Dotykaj czaszki myszy, aż zostanie zidentyfikowane połączenie czaszkowo-szyjne. Użyj nożyczek ustawionych pod kątem prostopadłym do zwierzęcia, aby przeciąć mięśnie szyjki macicy i kręgosłup na skrzyżowaniu czaszkowo-szyjnym. Następnie rozetnij kręgosłup doogonowo i użyj nożyczek, aby wykonać pełną transsekcję ogonową na piątym kręgu lędźwiowym.
Następnie ustaw mysz w pozycji leżącej na plecach i po wykonaniu nacięcia wzdłuż linii środkowej od szyi do brzucha cofnij skórę na boki, a następnie rozetnij otrzewną.
Czaszkowo otwórz ścianę klatki piersiowej nożyczkami. Po usunięciu narządów otrzewnowej i zaotrzewnowej za pomocą kleszczy i ostrza chirurgicznego przeciąć żebra, pozostawiając około 5 milimetrów żeber wystających z kręgosłupa. Usuń kręgosłup od reszty ciała i umyj dwukrotnie zimnym PBS.