JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 2:42 min. • April 30th, 2023
Sferoidy nowotworowe to trójwymiarowe agregaty komórkowe komórek nowotworowych. Te sferoidy mogą być osadzone w macierzy kolagenowej, co powoduje tworzenie się bloków sferoidalnych. Aby błyskawicznie zamrozić blok sferoidalny, zacznij od umieszczenia sferoidalnego bloku żelu kolagenowego w środku formy histologicznej.
Przepłucz blok odpowiednim buforem i uzupełnij pleśń roztworem utrwalającym. Inkubować, aby ten roztwór mógł przeniknąć do sferoid i usieciować białka komórkowe. Ten krok pomaga utrzymać strukturę sferoidalną przed kolejnym zabiegiem. Następnie odessać roztwór utrwalający
.Umieść blok żelu sferoidalnego w świeżej formie histologicznej zawierającej cienką warstwę podłoża do zatapiania. Pokryj go większą ilością podłoża do zatapiania, aby całkowicie zanurzyć blok sferoidalny. Na koniec zanurz formę w kąpieli ciekłego azotu na krótki czas.
Szybkie zamrażanie zapobiega tworzeniu się większych kryształków lodu w sferoidach. Pomaga w zachowaniu integralności sferoidalnej bez powodowania uszkodzeń mechanicznych. Gdy warstwa podłoża do zatapiania zestali się wokół bloku sferoidalnego, usuń zamrożony blok z formy. Zamrożony blok sferoidalny należy przechowywać w niskich temper
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych