Dożylne mikrowstrzyknięcie nefrotoksyn do zarodka danio pręgowanego: technika dostarczania środków nefrotoksycznych do krwiobiegu zarodka danio pręgowanego

Dożylne mikrowstrzyknięcie ułatwia dostarczenie interesujących cząsteczek do krwiobiegu zwierzęcia biorcy. Aby dostarczyć nefrotoksyny do zarodka danio pręgowanego, najpierw należy przygotować odpowiednie stężenie pożądanego roztworu nefrotoksyny.

Za pomocą końcówki ładującej z drobnym żelem załaduj ten roztwór nefrotoksyny do igły do mikroiniekcji z zaostrzoną kątową końcówką. Zawiesić igłę pionowo, aby roztwór nefrotoksyny wypełnił końcówkę igły grawitacyjnie. Teraz należy umieścić załadowaną igłę do mikroiniekcji w uchwycie mikromanipulatora.

Następnie przenieś znieczulony zarodek danio pręgowanego do prefabrykowanej formy mikroiniekcyjnej. Wyrównaj zarodek w formie z głową zorientowaną w studzience i ogonem na zewnątrz studzienki, poprawiając dostęp do ogona do mikrowstrzyknięcia. Następnie dokładnie umieść końcówkę igły w pobliżu zarodka.

Wstrzyknąć roztwór nefrotoksyny do żyły ogonowej zarodka. Wstrzyknięte środki nefrotoksyczne rozprzestrzeniają się w krążeniu i docierają do odległych narządów, takich jak nerki. Delikatnie wycofać igłę. Przenieś zarodek do świeżego naczynia zawierającego pożywkę dla zarodków i pozwól mu się zregenerować. Inkubuj zarodek przez określony czas.