JoVE Encyclopedia of Experiments
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:24 min • April 30th, 2023
W chorobie opon mózgowo-rdzeniowych komórki rakowe z innych narządów ciała dają przerzuty do płynu mózgowo-rdzeniowego lub płynu mózgowo-rdzeniowego zawartego w oponach mózgowo-rdzeniowych - cienkich warstwach tkanki otaczających mózg.
Iniekcja domózgowo-komorowa ułatwia bezpośrednie podawanie leku w płynie mózgowo-rdzeniowym, omijając barierę krew-mózg.
Na początek przygotuj znieczuloną mysz w pozycji leżącej.
Naciąć głowę, aby odsłonić czaszkę. Zlokalizuj bregmę - punkt połączenia szwów czołowych i strzałkowych.
Za pomocą mikrowiertła wywierć otwór w czaszce w odpowiedniej odległości od bregmy, aby uzyskać dostęp do najbardziej zewnętrznej warstwy oponowej gęstej tkanki łącznej - opony twardej.
Następnie delikatnie włóż ommaya - mały port do wstrzykiwań - do otworu.
Po zakończeniu zszyj otaczającą skórę i pozwól ommayi przymocować się na optymalny czas.
Następnie podłączyć strzykawkę wypełnioną żądaną zawiesiną leku do ommaya.
Po ustawieniu odpowiedniego natężenia przepływu należy wstrzyknąć zawiesinę leku do opony twardej.
Ommaya zapewnia sterylną drogę do bezpośredniego dostarczania leku do płynu mózgowo-rdzeniowego w komorach mózgowych mózgu.
Teraz odłącz strzykawkę i pozostaw ommaya nienaruszoną w czaszce do późniejszego dawkowania.
Pozwól myszy na odzyskanie sprawności.
Z biegiem czasu cząsteczki leku migrują w kierunku miejsca raka i zapobiegają wzrostowi i proliferacji komórek rakowych.
Zmontuj urządzenie iniekcyjne Murine Ommaya za pomocą miniaturowego portu iniekcyjnego 25G i 1-milimetrowej tarczy dystansowej.
Użyj sterylnego kleju cyjanoakrylowego, aby zapewnić penetrację około 2,5 milimetra metalowej kaniuli do prawej półkuli mózgowej i przygotuj skórę zgodnie z techniką sterylną.
Wykonaj małe nacięcie skóry, a następnie rozwarstwienie leżących pod spodem tkanek podskórnych, aby odsłonić czaszkę. Osusz czaszkę za pomocą aplikatora w sztyfcie nasączonego wodą wodorową z bawełnianą końcówką.
Wywierć 0,9-milimetrowy otwór w czaszce, 0,5 milimetra z tyłu i 1,1 milimetra z boku bregmy, aby odsłonić oponę twardą.
Odsuń mikrowiertło na bok i delikatnie naciąć kość bezpośrednio otaczającą otwór w zadziorach. Przymocuj port do wstrzykiwań do czaszki za pomocą sterylnego kleju cyjanoakrylowego i wprowadź go na głębokość około 2,5 milimetra.
Zszyj nacięcie za pomocą niewchłanialnych nylonowych szwów 4-0 w przerywanym wzorze ściegu lub szwu sznurkowego do torebki. Trzymaj myszy pooperacyjne w indywidualnych klatkach do rekonwalescencji.
Aby dozować mysz, uzyskaj dostęp do myszy Ommaya za pomocą adaptera do wstrzykiwań portu i strzykawki Hamiltona. Za pomocą kleszczyków przytrzymaj górną część miniaturowego portu iniekcyjnego i delikatnie włóż adapter wtryskiwacza portu całkowicie do przegrody portu.
Po wykonaniu wstrzyknięcia należy odłączyć wstrzykiwacz Mysz Ommaya od adaptera do wstrzykiwań z portem za pomocą kleszczyków.