JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:55 min. • April 30th, 2023
Aby wyizolować jądra, zacznij od pobrania świeżo zamrożonej próbki glejaka - guza, który pochodzi z komórek glejowych mózgu - na szalce Petriego.
Umieść szalkę Petriego na lodzie, aby uniknąć degradacji tkanek.
Następnie zmiel próbkę tkanki na małe kawałki.
Dodaj wstępnie schłodzony bufor do lizy do zmielonych kawałków tkanki. Przenieść mieszaninę do homogenizatora Dounce. Za pomocą tłuczka homogenizuj tkankę, aby rozbić komórki i zainicjować lizę.
Teraz przenieś homogenat do probówki mikrowirówki zawierającej świeży bufor do lizy.
Mechanicznie rozbić homogenat za pomocą końcówki do pipety o szerokim otworze. Ten krok ułatwia uwalnianie organelli cytoplazmatycznych z komórek.
Następnie, używając sitka komórkowego o odpowiedniej wielkości, przefiltruj homogenat do świeżej probówki, aby usunąć resztki tkanek i inne zanieczyszczenia.
Po filtracji pobrać filtrat zawierający różne organelle komórkowe.
Odwirować filtrat z małą prędkością, aby zagnieździć gęstsze jądra na dnie, podczas gdy inne organelle komórkowe pozostają w supernatancie.
Odrzucić sklarowany sklarant zawierający organelle. Przechowywać surowy osad bogaty w jądra w odpowiednim buforze do przechowywania w celu dalszego se
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych