Test przepuszczalności naśladującej barierę krew-mózg: Test in vitro do oceny przepuszczalności naśladownictwa BBB dla cząsteczek znacznikowych
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 2:53 min. • April 30th, 2023
Bariera krew-mózg (BBB), składająca się z komórek śródbłonka, perycytów i astrocytów, reguluje napływ i odpływ cząsteczek biologicznych oraz pomaga w utrzymaniu homeostazy mózgu.
Aby ocenić przepuszczalność modelu BBB in vitro, należy rozpocząć od modelu BBB in vitro składającego się z przylegających komórek śródbłonka po górnej lub krwionośnej stronie wkładki błony porowatej i przylegających astrocytów po stronie podstawy lub mózgu błony.
Komórki śródbłonka ze swoją macierzą zewnątrzkomórkową stykają się z astrocytami, tworząc naśladownictwo BBB.
Przenieś żądaną objętość pożywki z krwi i strony mózgu do czarnej płytki wielodołkowej w celu uzyskania optymalnego pomiaru fluorescencji.
Zastąp pożywkę od strony krwi pożywką zawierającą fluorescencyjne cząsteczki znacznikowe o małej masie cząsteczkowej.
W hodowli kontakty komórek śródbłonka z astrocytami wzmacniają barierę komórkową i stabilizują szczelną barierę, ograniczając dyfuzję cząsteczek znacznikowych do strony mózgu hodowli.
Ponadto zbierz odpowiednie objętości pożywki od strony krwi i mózgu w pożądanych punktach czasowych. Zastąp obie strony nośnikiem, aby zachować objętość nośnika.
Na koniec należy użyć wielodołkowego czytni
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych