Izolacja nabłonka brodawek obwodowych (CVP) z modelu mysiego: procedura enzymatyczna mająca na celu oddzielenie nabłonka CVP od języka myszy

Grzbietowa powierzchnia języka myszy pokryta jest trzema głównymi rodzajami wypukłych wypukłości zwanych brodawkami, a mianowicie brodawkami grzybowymi, obwodowymi i nitkowatymi. Brodawki obwodowe lub CVP, składające się z rowów nabłonkowych, w których znajdują się kubki smakowe, są podtrzymywane przez warstwę tkanki łącznej - blaszkę właściwą.

Aby wyizolować nabłonek CVP, zacznij od uśpionej myszy w pozycji leżącej. Następnie naciąć policzki i wypreparować gruby pas tkanki - wędzidełko językowe - aby oddzielić język od dna jamy ustnej. Przenieść wycięty język do naczynia zawierającego schłodzony bufor.

Następnie wytnij przednią część języka. Ostrożnie wstrzyknąć koktajl trawienny zawierający enzymy dyspazy i kolagenazy do przestrzeni podnabłonkowej regionu CVP, między nabłonkiem a tkankami leżącymi poniżej. Wycofać igłę, jednocześnie wstrzykując zawiesinę w to miejsce.

Inkubuj język przez odpowiedni czas. Dypazy i kolagenazy trawią białka macierzy zewnątrzkomórkowej w tkance łącznej, ułatwiając oddzielenie nabłonka CVP od tkanki. Po inkubacji wykonaj nacięcia w nabłonku w okolicy CVP.

Delikatnie oddziel rozluźniony nabłonek od znajdującej się pod nim tkanki. Na koniec przenieś odd