Generowanie mysiego modelu zawału mięśnia sercowego: zabieg chirurgiczny trwałego podwiązania lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej w modelu mysim

Na początek przygotuj znieczuloną mysz w pozycji leżącej. Wykonaj podłużne nacięcie w szyi i przemieszcz gruczoły ślinowe. Następnie oddziel powięź - warstwę tkanki łącznej otaczającą mięśnie paska - aby odsłonić leżącą pod spodem tchawicę.

Przez usta wprowadzić kaniulę intubacyjną i potwierdzić dokładne wprowadzenie tchawicy przez nacięcie. Podłącz kaniulę do respiratora ustawionego na żądane parametry, które zapewniają odpowiednią wentylację myszy.

Teraz ustaw mysz w prawej bocznej pozycji odleżynowa. Naciąć skórę między lewymi mięśniami piersiowymi i oddzielić powięź. Zmień wentylator na dodatnie ciśnienie końcowe wydechowe lub ustawienie PEEP.

Wykonaj torakotomię lewostronną w trzeciej przestrzeni międzyżebrowej - nacięciu wykonanym między trzecim a czwartym żebrem. Dodatnie ciśnienie w drogach oddechowych w trybie PEEP pozwala uniknąć zapadnięcia się pęcherzyków płucnych podczas torakotomii.

Po uzyskaniu dostępu do serca usuń osierdzie. Zidentyfikuj lewą przednią zstępującą tętnicę wieńcową lub LAD - jaskrawoczerwone naczynie odgałęziające się od lewej tętnicy wieńcowej. Tętnica LAD dostarcza krew do większej części lewej komory.

Chirurgicznie zwiąż tętnicę LAD proksymalnie do lewego przedsionka. To podwiązanie tętnicy LAD powoduje bladość komory. Zamknij nacięcie. Umieść zwierzę z powrotem w klatce. Stałe podwiązanie tętnicy LAD utrudnia przepływ krwi i dopływ tlenu do mięśnia sercowego, powodując jego uszkodzenie i śmierć.

Użyj elektrycznej maszynki do golenia, aby szybko ogolić znieczuloną, męską mysz C57BL/6 o wadze od 25 do 30 gramów na gardle i lewej stronie klatki piersiowej. Potwierdź brak reakcji na szczypanie palców u stóp. Nałóż maść na oczy zwierzęcia. Umieść mysz w pozycji leżącej na poduszce grzewczej i umieść mały kompres z gazy pod głową, aby uniknąć przegrzania oczu.

Zabezpiecz kończyny taśmą klejącą. Przełóż pętlę jedwabnego szwu 5-0 pod górnymi siekaczami i przymocuj koniec pętli do poduszki grzewczej, aby usta były otwarte podczas kaniulacji. Nałóż krem do depilacji na wcześniej ogolone miejsca i delikatnie masuj wacikiem przez 1 minutę.

Usuń nadmiar sierści i kremu gazą i oczyść odsłoniętą skórę kroplami 0,9% roztworu soli fizjologicznej i gazy. Nałóż kawałki sterylnej gazy na ogolone gardło i klatkę piersiową i nasącz gazę jodopowidonem. Ustaw wentylator na objętość oddechową 7 mililitrów na kilogram i szybkość wentylacji 140 uderzeń na minutę.

Przesuń mysz pod mikroskopem stereoskopowym do mikrochirurgii. Trzymając skórę na środku gardła, wykonaj 0,5-centymetrowe nacięcie wzdłuż linii ogonowej/głowowej i oddziel płaty gruczołu ślinowego. Użyj zakrzywionych kleszczy, aby delikatnie oddzielić powięź mięśnia mostkowo-gnykowego, aż krtań i tchawica będą widoczne. Następnie zabezpiecz krawędzie otworu za pomocą zwijaczy przymocowanych do elastycznych taśm.

Następnie delikatnie pociągnij język na boki i za pomocą kleszczy włóż wewnętrzną igłę kaniuli o rozmiarze 16 do tchawicy. Wyobraź sobie prawidłowe wprowadzenie do tchawicy przez nacięcie gardła i podłącz kaniulę do respiratora. Umieść sterylną 0,9% sól fizjologiczną uzupełnioną gazą nasączoną jodopowidonem na nacięciu, aby utrzymać mokre tkanki podczas operacji.

Następnie umieść rurkę wydechową w wodzie. Obecność pęcherzyków wskazuje na udaną intubację. W celu podwiązania lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej lub LAD, ostrożnie przesuń mysz do pozycji odleżynowej po prawej stronie i zabezpiecz lewą kończynę przednią w nowej pozycji.

Zidentyfikuj linię między lewym mięśniem piersiowym mniejszym a większym i wykonaj ukośne 1-centymetrowe nacięcie skóry wzdłuż linii. Za pomocą mikronożyczek preparacyjnych oddziel powięź mięśni piersiowych bez nacinania tkanek i użyj retraktorów przymocowanych do elastycznych taśm, aby utrzymać separację.

Ustaw wentylator na dodatnie ciśnienie końcowo-wydechowe 3 centymetry wody. Użyj kleszczy, aby otworzyć jamę klatki piersiowej w trzeciej przestrzeni międzyżebrowej między trzecim a czwartym żebrem. Umieść dwa zwijacze w klatce piersiowej, po jednym na każdym żebrze i użyj zakrzywionych cienkich kleszczy, aby ostrożnie usunąć osierdzie, nie uszkadzając serca i płuc.

Zlokalizuj LAD jako powierzchowną jasnoczerwoną linię biegnącą od krawędzi lewej małżowiny usznej w kierunku wierzchołka. Użyj uchwytu na igłę, aby wprowadzić jedwabny szew 7-0 pod LAD, 2 do 3 milimetrów poniżej lewego przedsionka. Ciągnąc jedwab powoli, aby uniknąć rozdarcia tkanki serca, zawiąż ligaturę trzema węzłami. Dolna lewa część lewej komory natychmiast zblednie po podwiązaniu.

Teraz zwolnij zwijacze żeber i trzymając trzecie żebro kleszczami, wykonaj dwa przejścia z jedwabnym szwem 6-0 pod trzecim i czwartym żebrem. Umieść trzy krople 0,9% roztworu soli fizjologicznej o temperaturze 37 stopni Celsjusza na otworze i zamknij rurkę wydechową na 2 lub 3 cykle oddechowe, aby prawidłowo napompować płuca.

Zaciśnij i zabezpiecz szew dwoma rzutami i zwolnij zwijacze przytrzymujące mięśnie, pomagając mięśniom powrócić do prawidłowego położenia anatomicznego. Następnie zamknij skórę klatki piersiowej dwoma szwami i dwoma rzutami jedwabiu do szwów 5-0. Zamknij skórę gardła jednym szwem, jedwabiem do szwów 5-0 i dwoma rzutami.