Odlewanie żywicy układu żółciowego: technika analizy architektury 3D układu żółciowego w modelu mysim z wykorzystaniem wstrzykiwania żywicy nieprzepuszczalnej dla promieni rentgenowskich

0 views • 4:32 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Układ żółciowy składa się z wątroby, pęcherzyka żółciowego i sieci przewodów, które łączą się, tworząc wspólny przewód żółciowy lub C-B-D, który transportuje żółć do jelita.

Do odlewania żywicy układu żółciowego weź mysz, która została poddana perfuzji w celu usunięcia krwi z wątroby i pęcherzyka żółciowego.

Umieść mysz w pozycji leżącej.

Wizualizuj jamę brzuszną pod mikroskopem preparacyjnym, aby zlokalizować trzewną powierzchnię wątroby w celu zidentyfikowania zwieracza Oddiego - warstwy mięśniowej obecnej na dystalnym końcu CBD, zanim dostanie się do jelita.

Wykonaj ukośne nacięcie w CBD obok zwieracza Oddi.

Włóż rurkę do CBD. Podłącz drugi koniec rurki do strzykawki zawierającej kolorową i nieprzepuszczającą promieni rentgenowskich zawiesinę żywicy.

Wstrzyknąć zawiesinę żywicy do kanału.

Żywica przemieszcza się z CBD do sieci mniejszych dróg żółciowych, ostatecznie rozprzestrzeniając się w wątrobie i woreczku żółciowym. Rozprzestrzenianie się można śledzić, wizualizując ruch kolorowej żywicy przez zaciski małych kanałów.

Zdejmij rurkę i pozwól żywicy spolimeryzować.

Uzyskaj obrazy mikro-CT kanałów. Żywica, która jest nieprzepuszczalna dla promieni rentgenowskich, nie przepuszcza przez nią promieni rentgenowskich, co stanowi kontrast dla układu żółciowego i pomaga w analizie jego architektury 3D.

Przed wstrzyknięciem żywicy do układu żółciowego myszy należy rozpocząć przesuwanie jelita i trzustki na lewą stronę myszy za pomocą bawełnianego wacika, zwilżonego PBS, w celu odsłonięcia wspólnego przewodu żółciowego i żyły wrotnej. Następnie wykonaj małe poprzeczne nacięcie w żyle głównej dolnej. Odwróć brzuszną stronę wątroby w kierunku serca, aby odsłonić powierzchnię trzewną i obszar wnęki, a następnie zlokalizuj wspólny przewód żółciowy, który biegnie od obszaru wnęki przez trzustkę i do jelita przy zwieraczu Oddi. Użyj prostych kleszczy, aby oczyścić otaczający obszar tkanki w odległości około 5 milimetrów od wspólnego przewodu żółciowego.

Następnie, umieszczając jedwabną nić do szwów pod wspólnym przewodzie żółciowym, zawiąż luźny węzeł wokół wspólnego przewodu żółciowego. Przytrzymaj nożyczki sprężynowe płasko przy wspólnym przewodzie żółciowym, aby wykonać ukośne nacięcie przewodu żółciowego wspólnego w miejscu, w którym przewód żółciowy wspólny wchodzi do trzustki i jelita, obok zwieracza Oddi. Następnie wymieszaj 1 mililitr żółtej żywicy z 50 mikrolitrami utwardzacza MV i napełnij 1-mililitrową strzykawkę Luer mieszaniną żywicy i utwardzacza.

Połącz napełnioną strzykawkę z zestawem wężyków #1 i naciśnij tłok, aby napełnić rurkę, aż mieszanina środka utwardzającego żywicę zacznie kapać z końcówki rurki. Użyj kleszczy, aby wyprostować obszar wokół nacięcia wspólnego przewodu żółciowego, przed włożeniem rurki do otworu w wspólnym przewodzie żółciowym, najdłuższą krawędzią skośnej końcówki skierowaną w dół w kierunku grzbietowej strony przewodu żółciowego. Następnie zaciśnij węzeł jedwabnej nici, aby zabezpieczyć rurkę wewnątrz wspólnego przewodu żółciowego.

Po wstrzyknięciu żywicy do wspólnego przewodu żółciowego należy obserwować pęcherzyk żółciowy i poszczególne płaty wątroby. Masuj wątrobę bawełnianym wacikiem zwilżonym PBS, aby równomiernie rozprowadzić żywicę. Końcowe odgałęzienia dróg żółciowych wypełnionych żywicą będą słabo widoczne na powierzchni wątroby. Należy przerwać wstrzykiwanie żywicy, gdy na powierzchni wątroby pojawią się kropki żywicy lub gdy napotkany jest opór. Następnie usuń rurkę, wyciągając ją ze wspólnego przewodu żółciowego i szybko zaciśnij jedwabny węzeł za pomocą kleszczy, aby zapobiec wyciekaniu żywicy.

09:13

Badanie wektorów wirusowych w trójwymiarowym modelu wątroby wypełnionym ludzką linią komórkową raka wątrobowokomórkowego HepG2

Related Videos

0 Views

04:38

Częściowe podwiązanie dróg żółciowych u myszy: kontrolowany model zlokalizowanej cholestazy obturacyjnej

Related Videos

0 Views

05:37

Hepatektomia zrazikowa częściowa: chirurgiczny model morfologicznej regeneracji wątroby

Related Videos

0 Views

06:42

Odlew naczyniowo-mózgowy dorosłej myszy do obrazowania 3D i analizy morfologicznej

Related Videos

0 Views

08:47

Trójwymiarowe odlewanie żywicy i obrazowanie żyły wrotnej myszy lub wewnątrzwątrobowego przewodu żółciowego

Related Videos

0 Views

08:42

Wykorzystanie wielofluorowanych kwasów żółciowych i rezonansu magnetycznego in vivo do pomiaru transportu kwasów żółciowych

Related Videos

0 Views

06:46

Ilościowa analiza aortapatii metodą mikro-CT w mysim modelu tętniaka i rozwarstwienia aorty wywołanego β-aminopropionitrylem

Related Videos

0 Views

07:35

Określanie gęstości dróg żółciowych w wątrobie myszy

Related Videos

0 Views

09:00

Odlew naczyniowy płuc myszy dorosłych i wczesnych po urodzeniu do obrazowania mikro-CT

Related Videos

0 Views

12:39

DUCT: Podwójny odlew z żywicy, a następnie tomografia mikrokomputerowa do analizy wątroby 3D

Related Videos

0 Views

Last updated: 1 August 2026