JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 3:56 min. • July 8th, 2025
Umieść znieczuloną ciężarną mysz w pożądanym wieku ciążowym w pozycji leżącej. Wysterylizuj okolicę brzucha. Wykonaj laparotomię - chirurgiczne nacięcie przez ścianę brzucha. Wypreparuj mięśnie brzucha, aby odsłonić jamę brzuszną.
Zidentyfikuj rogi macicy - długie struktury rurkowe, w których znajduje się wiele płodów - umożliwiając im jednoczesny rozwój. Delikatnie wysuń rogi macicy z jamy brzusznej, ustawiając je w orientacji poprzecznej. Ponadto wizualizuj szyję kandydującego zarodka myszy.
Delikatnie wprowadzić igłę chirurgiczną z szwem o odpowiedniej grubości poprzecznie przez okolicę rogu macicy, z dala od łożyska. Przesuń igłę dalej do przedniej części szyi, gdzie znajduje się tchawica. Skierować igłę tak, aby wychodziła z szyi naprzeciwko rogu macicy. Ostrożnie zaciśnij szew, aby zamknąć tchawicę, zapewniając integralność ściany macicy. Zwróć rogi macicy do jamy brzusznej.
Wstrzyknąć ciepłą sól fizjologiczną do jamy otrzewnej, aby ułatwić postęp ciąży. Zamknij nacięcie chirurgiczne i pozwól myszy dojść do siebie. Sprawdzony model okluzji tchawicy płodu myszy można wykorzystać do zbadania wpływu niedrożnej tchawicy na rozwój płuc.
Oczyść powierzchnię brzucha alkoholem i jodowidonem i utrzymuj sterylne warunki przez cały czas trwania operacji. Wykonaj pionowe nacięcie do laparotomii ciężarnych matek i odetnij wszystkie warstwy osobno. Zidentyfikuj rogi macicy po każdej stronie i określ potencjalne płody do operacji.
Operować dwa płody w każdym rogu macicy, jeśli po każdej stronie jest parzysta liczba płodów, i na jednym płodzie w każdym rogu macicy, jeśli jest liczba nieparzysta. Używając okularów z 2-krotnym powiększeniem do wizualizacji, ustaw róg macicy w sposób poprzeczny. Umieść szczenięta skierowane do góry między dwoma palcami, używając oczu i ogona jako przewodnika.
Delikatnie dociśnij głowę szczeniaka, aby umożliwić wyprostowanie głowy i wizualizację szyi. Wykonaj okluzję tchawicy lub TO za pomocą atraumatycznej igły i szwu polipropylenowego 6-0. Łożysko należy trzymać z boku i z dala od punktów wejścia i wyjścia igły.
Wbić igłę poprzecznie przez bok macicy, z dala od łożyska, przez jedną trzecią przedniej części szyi. Następnie delikatnie przesuń igłę do linii środkowej szyi. Skieruj go do przedniej części, a następnie wyjdź z szyi między tchawicą i naprzeciwko pochewki szyjnej i macicy.
Zawiąż szew, dbając o zachowanie integralności błon i ściany macicy. Wymień róg macicy w jamie brzusznej i wstrzyknij 2 mililitry ciepłej, sterylnej soli fizjologicznej do jamy otrzewnej przed zamknięciem.
Umieść biegnący szew poliglaktynowy 5-0, aby zamknąć ścianę brzucha i zamknij skórę niebiegnącym jedwabnym szwem. Zastosować dootrzewnowo 0,1 mg/kg buprenorfiny w celu znieczulenia i pozwolić matce dojść do siebie w ciepłym inkubatorze. Zwróć uwagę, że operowane zwierzę może samo się odżywiać i trzymać je samo w swojej indywidualnej klatce.