Izolacja kompleksu oocytów Cumulusa świni: technika izolacji kompleksu oocytów Cumulus z pęcherzyka jajnika świni w celu zapłodnienia in vitro

Oocyt świni otoczony jest zwartym, wielowarstwowym skupiskiem komórek wzgórka tworzących kompleks wzgórko-oocyt lub COC. Najbardziej wewnętrzne komórki wzgórka rozszerzają procesy przez osłonkę przejrzystą oocytu. W procesach tych rozwijają się zarówno połączenia szczelinowe, jak i pośrednie, które pomagają w międzykomórkowym przenoszeniu cząsteczek między oocytem a otaczającymi komórkami wzgórka. Te dwukierunkowe interakcje utrzymują żywotność COC, co jest kluczowym wyznacznikiem udanego zapłodnienia in vitro lub IVF.

Aby wyizolować COC, zanurz kilka pęcherzyków jajnikowych świń na szalce Petriego zawierającej pożywkę dojrzewającą. Pożywka ta zawiera hormony niezbędne do dojrzewania oocytów in vitro. Wypreparuj pęcherzyki jajnikowe, aby uwolnić COC i płyn pęcherzykowy na szalkę Petriego. Płyn ten uzupełnia pożywkę dojrzewającą w dodatkowe składniki odżywcze i hormony niezbędne dla kompetencji oocytów.

Odessać uwolnioną zawartość pęcherzyków i przenieść ją na inną szalkę Petriego. Wizualizuj płytkę pod mikroskopem, aby zidentyfikować nieuszkodzone COC, które wykazują normalną morfologię, składające się z okrągłych oocytów z umiarkowanie ziarnistą cytoplazmą i nienaruszonym ciałem p