Izolacja kompleksu oocytów Cumulusa świni: technika izolacji kompleksu oocytów Cumulus z pęcherzyka jajnika świni w celu zapłodnienia in vitro

0 wyświetleń3:02 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Oocyt świni otoczony jest zwartym, wielowarstwowym skupiskiem komórek wzgórka tworzących kompleks wzgórko-oocyt lub COC. Najbardziej wewnętrzne komórki wzgórka rozszerzają procesy przez osłonkę przejrzystą oocytu. W procesach tych rozwijają się zarówno połączenia szczelinowe, jak i pośrednie, które pomagają w międzykomórkowym przenoszeniu cząsteczek między oocytem a otaczającymi komórkami wzgórka. Te dwukierunkowe interakcje utrzymują żywotność COC, co jest kluczowym wyznacznikiem udanego zapłodnienia in vitro lub IVF.

Aby wyizolować COC, zanurz kilka pęcherzyków jajnikowych świń na szalce Petriego zawierającej pożywkę dojrzewającą. Pożywka ta zawiera hormony niezbędne do dojrzewania oocytów in vitro. Wypreparuj pęcherzyki jajnikowe, aby uwolnić COC i płyn pęcherzykowy na szalkę Petriego. Płyn ten uzupełnia pożywkę dojrzewającą w dodatkowe składniki odżywcze i hormony niezbędne dla kompetencji oocytów.

Odessać uwolnioną zawartość pęcherzyków i przenieść ją na inną szalkę Petriego. Wizualizuj płytkę pod mikroskopem, aby zidentyfikować nieuszkodzone COC, które wykazują normalną morfologię, składające się z okrągłych oocytów z umiarkowanie ziarnistą cytoplazmą i nienaruszonym ciałem polarnym otoczonym komórkami wzgórka.

Wyizolować pojedynczy COC i przenieść go do centralnej studzienki płytki IVF zawierającej pożywkę do dojrzewania. Przechowuj płytkę w optymalnej temperaturze do czasu dalszego użycia.

Aby wyizolować COC ze średniej wielkości pęcherzyków, przenieś dwa do trzech jajników na sterylną 10-centymetrową szalkę Petriego wypełnioną HM. Delikatnie przetnij powierzchnię wystających pęcherzyków jajnikowych sterylnym ostrzem chirurgicznym #15, co spowoduje, że płyn pęcherzykowy, a COC wypłyną na szalkę Petriego. Odessać zawartość pęcherzyków za pomocą igły o rozmiarze 28 dołączonej do jednorazowej strzykawki i przenieść ją na inną szalkę Petriego.

Aby przygotować szalki Petriego do zapłodnienia in vitro, dodaj 1 mililitr HM do centralnych dołków i umieść trzy do czterech kropli HM w zewnętrznych pierścieniach. Następnie za pomocą mikropipety z poliwęglanu przesuń nieuszkodzone COC do kropli HM w pierścieniach zewnętrznych i krótko je przepłucz trzy do czterech razy. Po zakończeniu przenieś je indywidualnie do centralnej studni. Przechowywać płytki IVF w inkubatorze.

07:16

Izolacja i charakterystyka mysich oocytów antralnych na podstawie organizacji chromatyny jąderkowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:30

Strategia hodowli in vitro oocytów z wczesnego pęcherzyka antralnego u bydła

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:53

Witryfikacja dojrzałych komórek jajowych pobranych in vitro z jajników dorosłych i przed okresem dojrzewania u owiec

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:37

Metoda enkapsulacji i hodowli pęcherzyków jajnikowych w proteolitycznie degradowalnym systemie trójwymiarowym

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:33

Hodowla 3D COC świń: procedura kapsułkowania kompleksów oocytów cumulusa w kulkach hydrożelowych z polimeru fibrynowo-alginianowego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:11

Analiza segregacji chromosomów, acetylacji histonów i morfologii wrzeciona w oocytach koni

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:04

Oparta na sieci neuronowej identyfikacja w pełni rozwiniętych oocytów myszy kompetentnych lub niekompetentnych rozwojowo

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:45

Hydrożele alginianowe zdegradowane proteolitycznie i mikrobioreaktory hydrofobowe do enkapsulacji oocytów świń

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:11

Izolacja małych pęcherzyków przedantralnych z jajnika bydlęcego przy użyciu kombinacji fragmentacji, homogenizacji i filtracji szeregowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:06

Natychmiastowe częściowe usunięcie kompleksów cumulus-oocyty: wyrafinowane podejście do szybkiej obserwacji zapłodnienia in vitro

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 22 sierpnia 2026