JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 3:29 min. • July 8th, 2025
Przygotuj złoże z fluorowanego etylenu propylenu lub FEP w naczyniu hodowlanym. Dodać kroplę pożywki do dojrzewania zawierającej kompleksy wzgórko-oocytów lub COC do proszku FEP. Delikatnie przetocz kroplę na proszek, aby uformować płynną kulkę lub LM. Proszek FEP tworzy hydrofobową porowatą powłokę, umożliwiając wymianę gazową między cieczą wewnętrzną a otaczającym środowiskiem.
Teraz zbierz jednostkę LM i przenieś ją do centralnej studzienki płytki Petriego do zapłodnienia in vitro. Dodaj sterylną wodę do zewnętrznego pierścienia, aby utrzymać nawodnienie COC. Następnie inkubuj LM w warunkach fizjologicznych, aby umożliwić dojrzewanie oocytów.
Następnie usuń zużyte podłoże i dodaj świeże podłoże do dojrzewania. Bezpośredni kontakt z cieczą przerywa hydrofobową powłokę FEP i rozbija LM w celu uwolnienia COC. Przenieś uwolnione COC do nowego naczynia zawierającego świeżą kroplę pożywki dojrzewającej i umyj je w celu usunięcia cząstek FEP.
Po umyciu przenieś COC i świeże podłoże na złoże proszkowe FEP. Zwiń kroplę, aby pokryć ją proszkiem. Na koniec przenieś LM na szalkę Petriego do zapłodnienia in vitro. Powlekane proszkowo LM FEP utrzymują strukturę 3D oocytów i zwiększają ich żyw
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych