JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 wyświetleń • 3:26 min • July 8th, 2025
Gałka oczna jest ukrwiona głównie z tętnicy ocznej. Gdy tętnica oczna przechodzi wzdłuż nerwu wzrokowego, rozgałęzia się, tworząc wiele krótkich tylnych tętnic rzęskowych lub SPCA.
Po tylnej stronie gałki ocznej SPCA rozgałęzia się na dwa rodzaje gałęzi. Gałęzie przywzrokowe wchodzą do twardówki - najbardziej zewnętrznej osłony oka - blisko nerwu wzrokowego. Natomiast dystalne SPCA przebijają twardówkę w niewielkiej odległości od nerwu wzrokowego.
Aby wyizolować SPCA, weź świeżo wypreparowane oko świni z przyczepionymi do niego nerwem wzrokowym i resztkami tkanki zewnątrzgałkowej. Zanurz gałkę oczną w komorze preparacyjnej zawierającej odpowiedni bufor fizjologiczny.
Przeanalizuj otaczające warstwy mięśni, aby uwidocznić tętnice wokół gałki oka. Wykonaj pełne nacięcie obwodowe na gałce oka, aby rozdzielić oko na przednią i tylną połowę. Usuń warstwę ciała szklistego z tylnej połowy oka.
Wizualizuj tylną połowę oka, aby zlokalizować nerw wzrokowy i sąsiednie naczynia krwionośne zagałkowe - naczynia krwionośne za gałką oczną. Zlokalizuj gałęzie przywzrokowe i dystalne krótkich tylnych tętnic rzęskowych.
Wyciąć te odcinki tętnic i przemyć je pożądanym buforem w celu usunięcia zanieczyszczeń i resztek krwi. Przechowuj SPCA do dalszej analizy.
Świeże oczy świń wraz z tkankami nerwu wzrokowego i zewnątrzgałkowego pobrano z lokalnej rzeźni bezpośrednio po sekcji zwłok. Umieść gałkę oczną w komorze separacyjnej zawierającej lodowaty bufor Krebsa-Henseleita. Ostrożnie odetnij otaczające mięśnie i tkanki ostrymi nożyczkami Mayo.
Wykonaj nacięcie skalpelem i przetnij kulę ziemską wzdłuż płaszczyzny równikowej ostrymi nożyczkami Mayo, aż oko zostanie rozdzielone na przednią i tylną połowę. Usuń jak najwięcej ciała szklistego z tylnej połowy oka za pomocą pary standardowych kleszczy.
Po użyciu szpilek preparacyjnych do ostrożnego przygwożdżenia tylnej połowy oka, delikatnie odetnij tkankę łączną otaczającą nerw wzrokowy, aby odsłonić leżące poniżej unaczynienie zagałkowe za pomocą nożyczek sprężynowych Student Vannas.
Odizoluj parę krótkiej tylnej tętnicy rzęskowej i dystalnej wraz z otaczającymi tkankami łącznymi za pomocą pęsety precyzyjnej typu 5 i nożyczek do kapsulotomii Vannasa. Delikatnie usuń tkankę łączną z odcinków tętniczych za pomocą pęsety i nożyczek z bardzo cienką końcówką, a następnie przepłucz izolowane tętnice w lodowatym PBS w celu usunięcia zanieczyszczeń i pozostałości krwi.