JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 3:15 min. • July 8th, 2025
Witryfikacja zarodków to ultraszybka technika kriokonserwacji, która schładza zarodki w niezwykle szybkim tempie do bardzo niskich temperatur, ułatwiając ich długotrwałe przechowywanie.
Na początek weź zebrane zarodki królika w odpowiedniej pożywce. Inkubować zarodki z roztworem równoważącym zawierającym niskie stężenia przenikających przez komórki krioprotektantów - glikolu etylenowego lub EG i dimetylosulfotlenku lub DMSO. EG i DMSO dyfundują przez błony komórkowe, zastępując cząsteczki wody wewnątrz komórek i zapobiegając tworzeniu się wewnątrzkomórkowych kryształków lodu.
Następnie inkubuj zarodki z roztworem witryfikacyjnym zawierającym wyższe stężenia EG i DMSO, aby umożliwić odpowiednie przenikanie krioprotektantów i wystarczający wewnątrzkomórkowy wypływ wody, chroniąc komórki przed uszkodzeniem przez zamarzanie.
Podłącz sterylny kriogeniczny nośnik słomy do mikrodozownika. Za pomocą mikrodozownika napełnij słomkę żądanym podłożem do odpowiedniego poziomu. Następnie odessać pęcherzyk powietrza, a następnie minimalną objętość roztworu witryfikacyjnego zawierającego zarodki i kolejny pęcherzyk powietrza.
Ponownie zasysać pożywkę, aż pierwsza frakcja podłoża po prostu zwilży i
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych