Chromatografia cieczowa oddziaływań hydrofobowych zależnych od butylu: technika charakteryzowania koniugatów przeciwciało-lek na podstawie oddziaływań hydrofobowych

Konkoniugaty przeciwciało-lek - ADC - są tworzone przez przyłączanie swoistego dla celu przeciwciała monoklonalnego z lekami cytotoksycznymi za pomocą odpowiednich łączników. Proces koniugacji stochastycznej tworzy ADC z różną liczbą ugrupowań leku.

Gatunki ADC charakteryzują się stosunkiem leku do przeciwciał lub DAR, który decyduje o ich skuteczności terapeutycznej. Hydrofobowość ADC sprawia, że są one odpowiednimi kandydatami do chromatografii cieczowej oddziaływań hydrofobowych lub charakterystyki opartej na HIC.

Aby rozpocząć, zmontuj kolumnę chromatograficzną zawierającą fazę stacjonarną na bazie matrycy agarozy. Matryca jest usieciowana z ugrupowaniami butylowymi - hydrofobowymi alkilowymi grupami funkcyjnymi. Zrównoważyć kolumnę buforem wiążącym o wysokiej zawartości soli. Postępuj zgodnie z nim, ładując rozwiązanie ADC do kolumny.

Jony soli w buforze przemieszczają cząsteczki wody wokół ADC, odsłaniając ich hydrofobowe obszary. Dzięki temu ADC mogą wiązać się z ligandami butylowymi poprzez oddziaływania hydrofobowe. ADC z większą liczbą związanych ugrupowań leku wykazują silniejszą interakcję z kolumną.

Powoli zastąpić bufor o wysokiej zawartości soli buforem elucyjnym o n