JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:21 min. • July 8th, 2025
Elektroforeza mikroprzepływowa to technika oddzielania fragmentów DNA o różnej wielkości w mikronaczyniach włosowatych.
Na początek weź wielodołkowy chip mikroprzepływowy z wyznaczonymi dołkami dla mieszaniny polimeru na bazie żelu i barwnika fluorescencyjnego, próbek DNA i znanej drabiny DNA o masie cząsteczkowej. Studnie te są połączone ze sobą siecią mikrokanałów.
Dozuj mieszankę żelu i barwnika do wyznaczonych studzienek. Zamontuj chip na stacji zasysającej wyposażonej w pustą strzykawkę. Naciskać tłok strzykawki, wywierając nacisk, aby wtłoczyć mieszaninę żelu i barwnika do mikrokanalika separacyjnego.
Wyjmij chip i odpipetuj pozostałe elementy do odpowiednich dołków. Dodać marker - wewnętrzny wzorzec, który kalibruje wielkość próbki - do studzienek zawierających drabinkę i próbki.
Włóż mikroczip do analizatora fragmentów, aby uruchomić chip. Po wejściu do środka przyłożone napięcie generuje siły elektroforetyczne, kierując próbkę ze studni do mikrokanału ładującego próbkę, skąd dociera do punktu przecięcia między tym kanałem a kanałem separacji. Prąd elektryczny pomaga próbce wejść do mikrokanału separacji.
Cząsteczki barwnika fluorescencyjnego interkalują ujemnie naładowane
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych