JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 2:52 min. • July 8th, 2025
Płatki zastawki aortalnej zawierają niejednorodną populację komórek śródmiąższowych zastawki lub VICs, rozmieszczonych w warstwach macierzy zewnątrzkomórkowej. Po stymulacji VIC przekształcają się w osteoblasty ― komórki tworzące macierz kostną.
Dojrzałe osteoblasty wydzielają kolagen i białka macierzy kostnej. Białka te pomagają osteoblastom przyczepiać się do macierzy. Wreszcie wewnątrzkomórkowe jony wapnia dostają się do środowiska macierzy i wraz z fosforanami osadzają się w postaci zmineralizowanych guzków, co prowadzi do zwapnienia zastawki aortalnej.
Aby ocenić stężenie wapnia w zwapniałych zastawkach aortalnych, należy rozpocząć od hodowli VIC na płytce sześciodołkowej. Wyrzuć pożywkę hodowlaną, dodaj pożywkę osteogenną do studzienki i inkubuj.
Podczas inkubacji insulina w pożywce osteogennej stymuluje VIC do różnicowania się w fenotypy osteogenne. Te osteoblasty wydzielają białka macierzy kostnej i kwas askorbinowy w środowisku osteogennym, co indukuje je do tworzenia bogatej w kolagen macierzy zewnątrzkomórkowej.
Wreszcie, wewnątrzkomórkowy wapń osteoblastów i fosforany pożywki tworzą zmineralizowane kryształy w pożywce.
Usuń pożywkę i dodaj roztwór kwasu solnego. Inkubow
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych