Test kiełkowania naczyniówki w celu zbadania proliferacji mikrokrążenia gałki ocznej ex vivo
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:48 min. • July 8th, 2025
W oku ssaków naczyniówka, znajdująca się między twardówką a siatkówką, zawiera makrofagi okołonaczyniowe i naczyniówkę włosowatą - warstwę naczyń włosowatych krwi wyłożoną perycytami, która dostarcza tlen i składniki odżywcze do siatkówki. Nieprawidłowe naczynie krwionośne wyrastające z naczyniówki występuje w wielu naczyniowych chorobach oczu.
Aby zbadać rozregulowaną naczyniówkę włosowatą kiełkującą ex vivo, weź zebrane eksplantaty oczu myszy zawierające naczyniówkę przyczepioną do twardówki i nabłonka barwnikowego siatkówki lub RPE.
Dodaj kropelki ekstraktu z błony podstawowej lub BME - hydrożelu wzbogaconego w białka macierzy zewnątrzkomórkowej - do studzienek płytki wielodołkowej. Umieść eksplantaty w kropli, unikając spłaszczania tkanek. Pozwól, aby BME zestalił się.
Dodać pożywkę uzupełnioną komórkami śródbłonka lub czynnikami wzrostu specyficznymi dla EC. Inkubować. RPE wydziela czynnik wzrostu śródbłonka naczyń krwionośnych, który wraz z czynnikami wzrostu specyficznymi dla EC stymuluje proliferację EC naczyń włosowatych.
Zestalony BME tworzy macierz zewnątrzkomórkową, która sprzyja proliferacji EC do tworzenia kiełkujących kanalików kapilarnych. Perycyty migrują i przycze
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych