JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:43 min. • July 8th, 2025
Aby zbadać interakcję białek z cząsteczkami lipidów, zacznij od dwóch rurek kapilarnych. Dodaj białka testowe znakowane barwnikiem fluorescencyjnym w obu probówkach i nieznakowane cząsteczki lipidów do jednej z nich. Umieść te naczynia włosowate w tablicy i umieść je w przyrządzie do termoforezy w mikroskali.
Naświetlić kapilar zawierającą białko skupionym światłem podczerwonym, powodując wzrost temperatury w ognisku, który dyfunduje przez roztwór, generując gradient temperatury w wąskim obszarze zawierającym białka znakowane fluorescencyjnie.
Detektor fluorescencji zbiera sygnał fluorescencyjny z tego samego miejsca kapilary - w którym skupia się laser. Procesor przetwarza sygnał i generuje wykres względnej fluorescencji w funkcji czasu.
W gradiencie temperatury znakowane białka zaczynają migrować z cieplejszego obszaru do chłodniejszego, wykazując termoforezę – zjawisko migracji zależnej od temperatury.
Dzięki termoforezie intensywność fluorescencji stopniowo zmniejsza się w czasie i osiąga stan ustalony, w którym znakowane białka osiągają równowagę.
Napromieniować naczynia włosowate zawierające mieszankę białkowo-lipidową, tworząc gradient temperatury.
Podczas termoforezy migruj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych