JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:36 min. • July 8th, 2025
Aby zbadać interakcję między białkiem wiążącym fosfolipidy a dwuwarstwą lipidową za pomocą mikrograwimetrii dyssypatywnej, należy wziąć mikrowagę z czujnikiem kwarcowym. Po przyłożeniu odpowiedniego napięcia warstwa kwarcu - umieszczona między dwiema metalowymi elektrodami - oscyluje z określoną częstotliwością.
Dodać zawiesinę małych jednowarstwowych pęcherzyków — składających się z pojedynczej dwuwarstwy lipidowej — do czujnika. Pęcherzyki adsorbują się na pokrytej krzemionką powierzchni hydrofilowej, zwiększając masę czujnika i proporcjonalnie zmniejszając jego częstotliwość oscylacji.
Pęcherzyki wypełnione buforem działają jak warstwa lepkosprężysta, prowadząca do rozpraszania - tłumienia oscylacji. Zaadsorbowane pęcherzyki pękają, uwalniając zamknięty bufor. Wynikający z tego spadek masy zwiększa częstotliwość oscylacji.
Pęknięte pęcherzyki tworzą ciągłą dwuwarstwę, naśladującą błonę biologiczną. Sztywność dwuwarstwy zmniejsza rozpraszanie.
Dodać bufor zawierający jony wapnia wraz z białkiem docelowym. Jony wapnia wiążą się z białkiem i zmieniają jego konformację, umożliwiając wiązanie się z cząsteczkami lipidów w dwuwarstwie.
Wiązanie białek zwiększa masę czujnika, co prowadz
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych