JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:13 min. • July 8th, 2025
Aby zbadać interakcje białko-lek, zacznij od mikrowagi kwarcowo-kryształowej, QCM, chipa czujnika składającego się z piezoelektrycznego materiału ceramicznego pokrytego cienką warstwą złota działającą jak elektroda.
Nałóż na elektrodę roztwór badanego leku, tworząc jednolitą warstwę.
Włóż chip czujnika do aparatu QCM. Zanurz go w kuwecie zawierającej bufor. Zastosuj pole elektryczne, powodując oscylacje kryształów ceramicznych ze stałą częstotliwością w oparciu o masę cząsteczek leku na chipie czujnika.
Dodaj bibliotekę fagów T7 zawierającą mieszaninę genetycznie modyfikowanych fagów wykazujących warianty peptydów połączone z białkiem kapsydu faga. Fagi wykazujące specyficzny peptyd wiążą się z cząsteczkami leku o wysokim powinowactwie i zostają unieruchomione na chipie czujnika. To panoramowanie fagów T7 zwiększa masę na chipie czujnika, co powoduje zmniejszenie oscylacji kryształów w czasie.
Po zrównoważeniu przenieś chip czujnika związany z fagiem na wilgotną szalkę Petriego. Nałóż chip na roztwór bakteryjny i inkubuj. Fagi infekują bakterie i replikują się, wytwarzając specyficzne fagi wykazujące ekspresję peptydów, które są uwalniane w roztworze.
Odzyskaj te fagi i przeanalizu
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych