JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:56 min. • July 8th, 2025
Dorosłe komórki somatyczne mogą być genetycznie przeprogramowane w celu uzyskania indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych, iPSC, które wykazują niezróżnicowane i proliferacyjne stany podobne do komórek macierzystych.
Aby rozróżnić ludzkie iPSC na makrofagi – białe krwinki, które fagocytozują patogeny i szczątki komórkowe – należy rozpocząć od płytki hodowlanej z niekomórkową powierzchnią adhezyjną
.Dodaj pożywkę zawierającą czynniki wzrostu, białko morfogenetyczne kości, czynnik komórek macierzystych i czynnik wzrostu śródbłonka naczyniowego. Wysiewać iPSC i inkubować.
Nieprzywierająca powierzchnia zapobiega przyczepianiu się iPSC i utrzymuje komórki w zawiesinie, ułatwiając agregację w trójwymiarowe ciała zarodkowe, EB. Czynniki wzrostu inicjują różnicowanie iPSC w obrębie EB do komórek linii mezodermalnej.
Przenieść zróżnicowane EB do probówki wirówkowej. Pozwól im osiąść dzięki grawitacji. Ponownie zawiesić EB w świeżych pożywkach zawierających interleukinę-3, IL3 i czynnik stymulujący tworzenie kolonii makrofagów, CSF1. Umieść EB na pokrytej żelatyną płytce do hodowli komórkowej.
Żelatyna – białko macierzy zewnątrzkomórkowej – ułatwia przyłączanie EB. IL3 stymuluj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych