Różnicowanie komórek zrębu szpiku kostnego myszy in vitro w adipocyty

Adipocyty, czyli komórki magazynujące tłuszcz, są dominującymi komórkami tkanki tłuszczowej - które wydzielają adipokiny - cząsteczki sygnalizacji immunologicznej, które regulują odpowiedź immunologiczną.

Aby wygenerować adipocyty in vitro, zacznij od płytki wielodołkowej zawierającej przylegającą hodowlę komórek zrębu szpiku kostnego myszy, BMSC — niezróżnicowanych komórek multipotencjalnych.

Potraktuj komórki pożywką do indukcji adipocytów zawierającą inhibitory enzymów fosfodiesterazy i deksametazon - syntetyczny glikokortykosteroid - w celu wywołania różnicowania komórek.

Inhibitory wnikają do komórek i dezaktywują fosfodiesterazy cyklicznych nukleotydów, enzymy niezbędne do rozkładu cyklicznego monofosforanu adenozyny lub cAMP. To hamowanie powoduje zwiększenie wewnątrzkomórkowego poziomu cAMP, krytycznego dla różnicowania komórek.

Deksametazon wiąże się z receptorami wewnątrzkomórkowymi w BMSC i dostaje się do jądra w celu aktywacji genów zaangażowanych w syntezę i akumulację lipidów. Indukuje to różnicowanie BMSC w preadipocyty - komórki prekursorowe dla dojrzałych adipocytów.

Zastąp zużytą pożywkę świeżą pożywką indukcyjną, aby utrzymać preadipocyty. Po określonym czasie po