Izolacja marginesujących leukocytów wątrobowych z wątroby myszy

Pęcherzowe leukocyty wątrobowe, MH, znajdują się przylegające do ścian wyspecjalizowanych naczyń krwionośnych wątroby lub sinusoid, które są wyściełane komórkami śródbłonka. Leukocyty MH są rekrutowane do otaczającej tkanki w odpowiedzi na stan zapalny.

Aby zebrać leukocyty MH, zacznij od uśpionej myszy w pozycji leżącej. Naciąć jamę otrzewną i klatkę piersiową, odsłaniając kompleks wątroby i krążeniowo-oddechowy.

Przemieszcz jelita, aby odsłonić żyłę wrotną, która przenosi krew ze śledziony, przewodu pokarmowego i powiązanych z nim narządów do wątroby. Włóż igłę podłączoną do pompy perystaltycznej do żyły wrotnej.

Wypreparuj żyłę główną dolną - główne naczynie krwionośne przenoszące odtlenioną krew z wątroby do serca - aby zebrać perfuzat podczas perfuzji.

Perfuzja wątroby przez żyłę wrotną za pomocą buforu zawierającego antykoagulant o niskiej szybkości przepływu przez krótki czas. Ten krok pomaga usunąć krew z nieprzylegającymi komórkami z naczyń krwionośnych wątroby przez odpływ żyły głównej dolnej. Wyrzuć ten zanieczyszczony krwią perfuzat.

Teraz perfuzuj z większą szybkością przepływu. Wymuszona perfuzja przy zwiększonym przepływie i szybkości ścinania zakłóca adhezję między