JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:06 min. • July 8th, 2025
Aby wygenerować emigrantów grasicy pochodzących z iPSC, iTE z niedojrzałych limfocytów T w systemie hodowli narządów grasicy 3D, należy pobrać deoksyguanozynę, mysie płaty grasicy leczone dGUO w odpowiednich podłożach.
dGUO dostaje się do środowiska grasicy i niszczy endogenne limfocyty grasicy, zapobiegając ich interferencji z niedojrzałymi limfocytami T pochodzącymi z iPSC podczas kohodowli.
Wykonaj głębokie nacięcie w środku każdego płata grasicy. Przenieś płaty do świeżej płytki hodowlanej zawierającej pożywkę uzupełnioną czynnikami wzrostu, czynnikiem komórek macierzystych, ligandem FLT3 i interleukiną-7.
Odpipetować pożywkę zawierającą płat grasicy do dołków płytki hodowlanej 3D. Dodaj niedojrzałe limfocyty T pochodzące z iPSC. Inkubować. Limfocyty T migrują do płatów grasicy przez nacięcie.
W środowisku grasicy czynniki wzrostu, ligand FLT3 i IL-7, wiążą się ze swoimi odpowiednimi receptorami na niedojrzałych limfocytach T, co prowadzi do aktywacji czynników transkrypcyjnych i ekspresji określonych genów.
W konsekwencji niedojrzałe limfocyty T przechodzą szereg zmian i nabierają specyficznych cech, ostatecznie dojrzewając do limfocytów T CD8αβ +, które na swojej powierzchni
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych