JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:14 min. • July 8th, 2025
Komórki NK to duże ziarniste limfocyty, które eliminują nowotwory i infekcje bakteryjne.
W celu ekspansji komórek NK ex vivo należy pobrać zawiesinę komórek jednojądrzastych krwi obwodowej, PBMC, zawierających niejednorodną populację limfocytów, w tym komórki NK. Dodaj napromieniowane komórki karmiące - nieproliferujące komórki limfoblastoidalne - które wyrażają związaną z błoną interleukinę 21, mIL-21, wymaganą do aktywacji i ekspansji komórek NK.
Dodaj kokulturę do specjalistycznej studni hodowlanej z membraną przepuszczającą gaz na dnie, umożliwiającą wymianę gazową. Komórki osiadają i namnażają się przez dłuższy czas bez konieczności pasażowania.
Dodaj interleukinę 2, IL-2 i interleukinę 15, IL-15 - cytokiny do proliferacji komórek NK. Inkubować przez odpowiedni okres w warunkach fizjologicznych.
mIL-21 na komórkach zasilających wiąże się ze specyficznym receptorem heterodimerycznym na komórkach NK. Egzogenne IL-15 i IL-2 wiążą się ze swoimi odpowiednimi receptorami. Wiązanie indukuje różne dalsze szlaki sygnałowe - aktywując ekspresję genów - ograniczając starzenie się komórek i prowadząc do przedłużonej proliferacji komórek NK.
Za pomocą cytometrii przepływowej oceniaj ekspan
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych