JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:58 min. • July 8th, 2025
Po uszkodzeniu naczyniowym płytki krwi są rekrutowane i aktywowane w miejscu urazu, tworząc czop płytkowy i inicjując naprawę tkanek.
Aby oczyścić płytki krwi z mysiej krwi pełnej i aktywować je in vitro, należy pobrać odpowiednią pożywkę o gradientze gęstości. Ostrożnie ułóż próbkę krwi na pożywce. Odwirować w celu oddzielenia płytek krwi od osocza oraz warstw czerwonych i białych krwinek.
Przenieść płytki krwi do dwóch nowych probówek zawierających odpowiedni bufor barwiący. Dodać syntetyczny tetrapeptyd GPRP zawierający sekwencję aminokwasową glicyna-prolina-arginina-prolina do jednej probówki, a następnie trombinę.
Trombina rozszczepia specyficzne zewnątrzkomórkowe domeny receptorów trombiny na powierzchni płytek krwi, inicjując kaskadę sygnalizacyjną i aktywując płytki krwi. Granulki aktywowanych płytek krwi uwalniają białko CD62P, które szybko przemieszcza się na powierzchnię błony.
Tetrapeptyd GPRP blokuje fibrynogen – glikoproteinę, która wiąże się z integryną CD41 / CD61 obejmującą błonę na aktywowanych płytkach krwi w celu zainicjowania agregacji płytek krwi – utrzymując w ten sposób aktywowane płytki krwi w zawiesinie.
Dodać znakowane fluorescencyjnie przeciwciała anty-C
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych