JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:25 min. • July 8th, 2025
Kanaliki nasienne jąder zawierają komórki Sertoliego, które odżywiają komórki rozrodcze. Komórki Sertoliego są połączone ścisłymi połączeniami i są mocno przymocowane do bogatej w kwas hialuronowy macierzy podstawnej. Takie ułożenie komórek Sertoliego reguluje wnikanie komórek odpornościowych do kanalików i chroni rozwijające się komórki rozrodcze przed degradacją.
Aby wyizolować komórki Sertoliego, zacznij od probówki zawierającej częściowo strawione kanaliki nasienne pochodzące z jąder myszy. Kanaliki te nie mają komórek okołokanalikowatych - komórek mięśni gładkich otaczających kanaliki nasienne.
Potraktuj kanaliki koktajlem enzymatycznym zawierającym hialuronidazę - niezbędną do hydrolizy kwasu hialuronowego - i DNazę.
Hialuronidazy dostają się do kanalików i rozszczepiają kwas hialuronowy - polisacharyd podstawowy - inicjując oderwanie komórek Sertoliego od macierzy podstawnej i uwalniając komórki rozrodcze do roztworu. DNaza trawi wszelkie zanieczyszczenia DNA z roztworu, zapobiegając agregacji komórek.
Przemyć trawione enzymatycznie kanaliki buforem, usuwając resztki enzymów, fragmenty komórkowe i komórki rozrodcze. Zawiesić strawione kanaliki i załadować zawiesinę do zestaw
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych