JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:19 min. • July 8th, 2025
Dziąsło, czyli tkanka dziąseł, otacza szyjną część zębów i kość szczęki.
Tkanka dziąseł składa się z warstwy nabłonka, oddzielonej od leżącej poniżej tkanki łącznej błoną podstawną bogatą w kolagen IV. Dziąsłowa tkanka łączna zawiera sieć komórek odpornościowych, w tym limfocyty, komórki tuczne i neutrofile, które chronią dziąsło przed infekcjami.
Aby wyizolować sieć komórek odpornościowych dziąseł, weź bloki zębów myszy zawierające mocno przyczepioną tkankę dziąseł. Potraktuj bloki koktajlem enzymatycznym - zawierającym kolagenazy typu czwartego i DNazy.
Kolagenazy wnikają do tkanki, degradują kolagen-IV i naruszają błonę podstawną oraz nabłonek dziąseł, powodując poluzowanie dziąseł z zębów. Tymczasem DNazy degradują zanieczyszczenia DNA. Dodaj środek chelatujący do probówki; w celu usunięcia kationów dwuwartościowych i zapobieżenia agregacji komórek.
Przenieś strawione bloki zębów na szalkę Petriego zawierającą pożywkę DNazy. Usuń tkankę dziąsła z bloków zębów i przenieś ją do sitka komórkowego.
Za pomocą tłoka rozgnieć chusteczkę. Ta mechaniczna dysocjacja przerywa dziąsłową warstwę łączną, uwalniając komórki odpornościowe z tkanki. Umyć sitko pożywką i zebrać uwolnione komórki
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych