JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:47 min. • July 8th, 2025
Śródnabłonkowe limfocyty gamma delta, γδ IELs, są wyspecjalizowanymi migrującymi limfocytami T wykazującymi ekspresję receptorów limfocytów T gamma delta. Komórki te znajdują się głównie w nabłonku jelitowym i patrolują nabłonek, aby ograniczyć translokację patogenów przez jelito.
Aby uwidocznić γδ IELs w żywym organizmie, zacznij od znieczulonej myszy transgenicznej z częściowo odsłoniętym jelitem cienkim. Transgeniczna mysz jest genetycznie modyfikowana w celu ekspresji białek reporterowych – wzmocnionych białek zielonej fluorescencji – wyłącznie w γδ IELs, co umożliwia ich śledzenie.
Za pomocą elektrokoagulacji utwórz linię perforacji nad odsłoniętym jelitem cienkim wzdłuż powierzchni antykrezki, zapobiegając nadmiernemu krwawieniu.
Wykonaj podłużne nacięcie nad linią perforacji, aby odsłonić błonę śluzową jelita, pokazując wiele wypustek przypominających palce — kosmki. Każdy kosmek zawiera komórki nabłonkowe z rezydującymi γδ IEL, które wystają do światła jelita.
Ustaw mysz tak, aby odsłonięta powierzchnia błony śluzowej miała bezpośredni kontakt z barwnikiem fluorescencyjnym, nadając światło czerwonej fluorescencji.
Wyobraź sobie mysz pod mikroskopem konfokalnym. Zlokalizuj k
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych