JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:41 min. • July 8th, 2025
Maceruj śledzionę i węzły chłonne myszy na sitku do komórek. Przepłukać sitko odpowiednim buforem w celu zebrania splenocytów i limfocytów.
Inkubuj komórki za pomocą biotynylowanego koktajlu przeciwciał i magnetycznych mikrogranulek antybiotyny, które wiążą się z komórkami innymi niż CD8+.
Przepuść zawiesinę komórek przez kolumnę magnetyczną. Dzięki sile magnetycznej komórki nie-CD8 + związane z kulkami wiążą się ze ścianą kolumny, podczas gdy limfocyty T CD8 + wymywają się.
Inkubuj elucjowane komórki ze sztucznymi komórkami prezentującymi antygen, aAPC. Są to nanocząstki magnetyczne funkcjonalizowane białkiem fuzyjnym głównego kompleksu zgodności tkankowej i immunoglobuliny obciążonym antygenem, MHC-Ig i przeciwciałem anty-CD28.
Naładowane antygenem MHC-Ig wiążą się z odrębnymi receptorami na specyficznych dla antygenu limfocytach T CD8 +. Przeciwciała anty-CD28 oddziałują z receptorami CD28 limfocytów T, inicjując aktywację limfocytów T.
Umieść probówkę zawierającą nanocząstki magnetyczne i mieszaninę komórek na stojaku magnetycznym. Limfocyty T CD8 + związane z aAPC są przyciągane do pola magnetycznego, podczas gdy niespecyficzne limfocyty T CD8 + pozostają zawieszone. Usunąć su
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych